一种桫椤多糖化合物及其提取方法和应用

专利2025-06-07  28


本发明涉及一种新的多糖化合物,具体涉及一种桫椤多糖化合物及其提取方法和应用。


背景技术:

1、桫椤(alsophila spinulosa(wall.ex hook.)r.m.tryon)是一种著名的孑遗植物,属桫椤科(cyatheaceae)桫椤属(alsophila),别名树蕨、蛇木等,是现存唯一的木本蕨类植物,高度可达数米,有“蕨类植物之王”的美誉。《中华人民共和国药典》收录了桫椤干燥茎干薄片可以入药,被称为“龙骨风”,有很好的药用价值,具有清热解毒、润肺止咳、除湿祛风等功效,和驱除蠕虫感染,减缓流感咳嗽和肝炎等。

2、桫椤的现代药理学研究表明,其具有抗炎症、抗肿瘤、抗菌、抗氧化等功效,民间有用桫椤叶片煎煮喝汤来祛痰止咳、清热解暑的用途。根据研究报道,桫椤的主要次生代谢化合物包括黄酮类、萜类、甾体、生物碱等。目前对桫椤的研究主要集中在桫椤茎干,而对于桫椤叶片的研究不多,并且很少报道桫椤叶片中的新多糖类的化合物的分离及其体外药理活性研究。

3、目前,从桫椤中分离出的次生代谢产物较少,且大都为已知化合物,结构新颖性低,因此,对桫椤中新化合物的开发和分离是亟待需求的。


技术实现思路

1、本发明的目的是提供一种桫椤多糖化合物及其提取方法和应用,从桫椤成熟叶片中分离得到,其具有较好的降血糖活性,可作为天然产物开发中药新药,具有广阔的医药应用前景。

2、为了达到上述目的,本发明提供了一种桫椤多糖化合物,该桫椤多糖化合物由鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖和葡萄糖醛酸组成,其结构如式i所示:

3、

4、优选地,该桫椤多糖化合物的分子量为17.746kda。

5、优选地,该桫椤多糖化合物是从桫椤成熟叶片中提取分离获得的。

6、优选地,该桫椤多糖化合物是通过将桫椤成熟叶片依次采用水提醇沉法提取、粗多糖除杂、离子柱分离、凝胶柱纯化而获得的。

7、优选地,所述离子柱采用的deae seplife ff阴离子交换柱;或/和,所述凝胶柱采用的sephacryl s-400hr凝胶柱。

8、本发明的另一目的是提供一种所述的桫椤多糖化合物的提取方法,该提取方法包含以下步骤:

9、(1)水提醇沉法提取

10、将成熟桫椤叶采用水提醇沉提取,收集沉淀固体,得到粗多糖提取物;

11、(2)粗多糖除杂

12、将所述粗多糖提取物用水充分溶解,向其中加入蛋白酶进行酶解,加入有机溶剂萃取,收集水相,然后加入大孔树脂ab-8,收集液体,3000da透析袋透析除去小分子组分,多糖液冷冻干燥,得到粗桫椤多糖;

13、(3)离子柱分离和凝胶柱纯化

14、将所述粗桫椤多糖用水溶解,过滤,然后经离子柱分离和凝胶柱纯化,收集洗脱液,浓缩,冻干,得到所述桫椤多糖化合物。

15、优选地,在步骤(1)中,所述水提醇沉采用无水乙醇沉淀;或/和,所述水提醇沉,水提的温度为60℃;或/和,所述水提醇沉,提取时间为4h;或/和,所述成熟桫椤叶采用无水乙醇脱脂。

16、优选地,在步骤(2)中,所述蛋白酶选自木瓜蛋白酶;或/和,所述有机溶剂萃取,为:向酶解液中加入三氯甲烷和正丁醇,充分混匀,收集上层水相;将石油醚加入收集的水相中,充分均匀,收集下层水相。

17、更优选地,在步骤(2)中,所述有机溶剂萃取,为:向酶解液中加入1/4体积三氯甲烷和正丁醇,充分混匀,收集上层水相;将石油醚加入收集的水相中,充分均匀,收集下层水相。

18、优选地,在步骤(2)中,用3000da透析袋透析48小时以去除小分子成分。

19、优选地,在步骤(3)中,所述离子柱分离,采用deae seplife ff阴离子交换柱,依次用水和0.1m、0.2m、0.3m的nacl溶液洗脱;或/和,所述凝胶柱纯化,采用sephacryl s-400hr凝胶柱。

20、更优选地,在步骤(3)中,所述离子柱分离,洗脱速度为4ml/min。

21、优选地,在步骤(3)中,所述离子柱分离,收集洗脱液,对其浓缩,透析分子量截止3000da,冻干,再进行凝胶柱纯化。

22、优选地,在步骤(3)中,所述凝胶柱纯化,将经离子柱分离获得的物质用水溶解,离心取上清液过凝胶柱,流速1ml/min,采用纯水洗脱1.5倍柱体积,收集所有洗脱液,浓缩,冷冻干燥,得到桫椤多糖化合物asp。

23、本发明的另一目的是提供所述的桫椤多糖化合物在制备降血糖药物、食品或保健品中的应用。

24、本发明的桫椤多糖化合物及其提取方法和应用,具有以下优点:

25、(1)本发明从桫椤成熟叶片中提取了一种新多糖化合物,经研究发现该多糖化合物具有显著的降血糖作用,可以作为新药物开发和药理活性研究的原料,还可以用于食品添加或保健品开发;

26、(2)本发明的多糖化合物源于桫椤成熟叶片,采用水提醇沉法提取、粗多糖除杂、deae seplife ff离子柱分离、sephacryl s-400hr凝胶柱纯化,该方法操作步骤仅4步,操作方法简单且快速,提取分离过程中主要采用水提取及无水乙醇沉淀,工艺方法环保,经该方法分离得到的化合物纯度较高均大于92%。



技术特征:

1.一种桫椤多糖化合物,其特征在于,该桫椤多糖化合物由鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖和葡萄糖醛酸组成,其结构如式i所示:

2.根据权利要求1所述的桫椤多糖化合物,其特征在于,该桫椤多糖化合物的分子量为17.746kda。

3.根据权利要求1所述的桫椤多糖化合物,其特征在于,该桫椤多糖化合物是从桫椤成熟叶片中提取分离获得的。

4.根据权利要求3所述的桫椤多糖化合物,其特征在于,该桫椤多糖化合物是通过将桫椤成熟叶片依次采用水提醇沉法提取、粗多糖除杂、离子柱分离、凝胶柱纯化而获得的。

5.根据权利要求4所述的桫椤多糖化合物,其特征在于,所述离子柱采用的deaeseplife ff阴离子交换柱;或/和,所述凝胶柱采用的sephacryl s-400hr凝胶柱。

6.一种如权利要求1~5中任意一项所述的桫椤多糖化合物的提取方法,其特征在于,该提取方法包含以下步骤:

7.根据权利要求6所述的提取方法,其特征在于,在步骤(1)中,所述水提醇沉采用无水乙醇沉淀;

8.根据权利要求6所述的提取方法,其特征在于,在步骤(2)中,所述蛋白酶选自木瓜蛋白酶;

9.根据权利要求6所述的提取方法,其特征在于,在步骤(3)中,所述离子柱分离,采用deae seplife ff阴离子交换柱,依次用水和0.1m、0.2m、0.3m的nacl溶液洗脱;

10.如权利要求1~5中任意一项所述的桫椤多糖化合物在制备降血糖药物、食品或保健品中的应用。


技术总结
本发明公开了一种桫椤多糖化合物及其提取方法和应用,该多糖化合物由鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖和葡萄糖醛酸组成。本发明的多糖化合物源于桫椤成熟叶片,采用水提醇沉法提取、粗多糖除杂、DEAE seplife FF离子柱分离、Sephacryl S‑400HR凝胶柱纯化,该方法操作简单且快速,提取分离过程中主要采用水提取及无水乙醇沉淀,工艺方法环保,经该方法分离得到的化合物纯度较高均大于92%,提取的多糖化合物经研究发现该多糖化合物具有显著的降血糖作用,可以作为新药物开发和药理活性研究的原料,还可以用于食品添加或保健品开发。

技术研发人员:黄雄,龚朋朋,宋平根,范江涛,何莹莹,卢兴秀
受保护的技术使用者:四川农业大学
技术研发日:
技术公布日:2024/12/17
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