本发明涉及医药，具体为一种低灌注脑梗死模型的建立方法。
背景技术：
1、脑卒中是一种发病率高、致残率高、病死率高、复发率高及并发症多的疾病。脑卒中包括缺血性和出血性卒中，其中缺血性脑卒中是临床最常见的类型，约占全部脑卒中的70％。缺血性脑卒中根据病因学可分为动脉粥样硬化型、小动脉闭塞型、心源性栓塞型、其他病因及病因不明型。而低灌注所致脑梗死是动脉粥样硬化型中较为常见的类型，其发病人数占急性脑卒中总数的10％～13％。
2、脑灌注是指血流通过毛细血管网将氧气和营养物质输送至脑组织并加以利用的过程，一般用单位时间内通过局部脑组织的脑血流量(cerebral blood flow，cbf)表示，是反映脑功能状态的重要指标。正常人大、小脑皮质、基底神经节、丘脑和脑干等灰质结构的血流量高于白质，全脑cbf约为50ml/(min·100g)，局部脑血流量(r cbf)<23ml/(min·100g)则为低灌注区域，患者可出现一定的临床症状，有助于急性缺血性卒中的诊断。
3、低灌注所致脑梗死是指患者的颅内灌注压低于正常值，而导致脑部血流下降、脑组织缺血，从而出现神经功能缺损症状的一类疾病。低灌注所致脑梗死主要包括两种，一种是颈部或颅内大动脉严重狭窄或闭塞后导致局部脑组织低灌注，临床多见相邻脑血管供血区分界处或分水岭区局部脑缺血，动脉支配的交界区低灌注更明显，称为分水岭梗死。另一种是系统性低灌注，即全身灌注压下降导致脑组织血流减少，故缺血灶不局限于分水岭区，常见原因为低血压和心脏泵衰竭(心肌梗死或严重心律失常)。
4、对于低灌注脑梗死的基础研究缺乏动物模型，目前研究大都采用双侧颈动脉结扎方法，此种方法模拟的是慢性脑缺血的状态，没有形成缺血梗死病灶，对于比较适合认知障碍的研究，不能体现低灌注所致脑梗死的病理过程。而目前使用较多的mcao动物模型，模拟了脑梗死的病灶，但未能体现低灌注的病因。低灌注所致脑梗死大多由于血压偏低、失血、休克等诱因，导致脑组织缺血梗死，如何模拟外周低灌注导致脑组织低灌注引发脑梗死值得探究。本专利的模型即是模仿临床常见的低血压引起的脑血流低灌注，导致脑梗死发生的病理过程。低灌注所致脑梗死的临床治疗与其他脑梗死不同，改善灌注是主要手段。因此模拟临床低灌注所致脑梗死对于研究本病的发病机制、观察药物疗效以及阐释作用机制尤为重要。
技术实现思路
1、鉴于现有技术中所存在的问题，本发明公开了一种低灌注脑梗死模型的建立方法，其特征在于，包括如下步骤：
2、步骤一，制备复方利血平混悬液，取复方利血平4片研磨成粉末状，溶于10ml0.9％氯化钠溶液中，置于4℃冰箱储存；
3、步骤二，将步骤一种得到的复方利血平混悬液，按照0.016mg/2.5ml/kg的剂量进行灌胃，早晚各1次，每日测量血压1次并记录；连续给药1周后选择收缩压≤110mmhg或较基线收缩压降低20％的大鼠进行改良mcao造模；
4、步骤三，将戊巴比妥钠安按照4mg/kg的计量向腹腔注射给药，麻醉后将大鼠仰卧位固定，颈部备皮消毒，沿颈部正中行纵切口3cm，分离两侧皮肤和颈前肌肉，颈部正中切口，肌群分离，分离右侧颈总动脉、颈外动脉和颈内动脉；分别结扎总动脉、颈外动脉近心端，动脉夹暂时夹闭颈内动脉；于颈总动脉离分叉5mm处用0.4mm一次性无菌注射针头穿刺一小口，置入硅胶线向颈内动脉入颅方向推进，系紧颈总动脉备线防止出血，松开颈内动脉动脉夹，缓慢送入线栓直至大脑中动脉起始部；双结扎紧颈总动脉套线，清理术野，缝合切口，消毒，手术结束；于切口处涂少量苦味酸溶液，以免互相舔咬伤口，得到模型组；
5、步骤四，选择新的一组大鼠重复步骤三，但不予复方利血平、不插硅胶线，得到假手术组；
6、步骤五，清醒活动30min后分别对模型组和假手术组进行神经功能评分，包括转棒疲劳时间、血压测定、激光散斑脑血流成像、脑梗死面积测定、ttc染色。
7、作为本发明的一种优选技术方案，所述步骤三中线栓长度为17-18mm。
8、本发明的有益效果：本发明突破既往双侧颈动脉结扎只能模拟慢性脑缺血、未形成缺血梗死病灶，不能模拟低灌注脑梗死的技术方法，首次运用降压联合改良mcao的复合方法，模拟临床常见的低血压引起的脑血流低灌注所致脑梗死的病理状态。即往报道永久性脑缺血mcao魔性的7天死亡率约50％，本方法将线拴深度控制在17-18mm，死亡率是25.5％，与对照组20mm深度的死亡率48.5％相比较，具有统计学差异。本发明为研究本病的发生发展病理过程、药物的药效药理学、阐释药物起效机制；为新药研发，提供一种可靠的动物模型。
1.一种低灌注脑梗死模型的建立方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种低灌注脑梗死模型的建立方法，其特征在于：所述步骤三中线栓长度为17-18mm。
