本发明属于蔬菜土传病害防治，具体涉及一种防治番茄土传病害的广谱生防制剂及其制备方法和应用。
背景技术：
1、茄科作物包含多种重要蔬菜、经济作物和观赏植物。其中，以马铃薯、番茄和辣椒为代表的茄科作物，作为重要粮食和蔬菜作物在全球日常饮食类别中占据重要地位，具有重要的经济价值。不过，茄科作物在生长过程中容易受到多种病害的侵袭，如不及时加以控制，会造成产量和质量明显下降。茄科蔬菜作物主要病害有番茄病毒病、番茄青枯病、番茄晚疫病、茄绵疫病、根结线虫病、辣椒病毒病和辣椒炭疽病等。
2、目前，在防治茄科作物病害方面，主要分为农业防治、物理防治、化学防治、生物防治或几种防治方法的综合运用。其中，农业防治主要是通过综合运用农业技术措施，包括选用抗病虫的优良茄科蔬菜品种，改进茄科蔬菜栽培方式，加强菜田管理，科学用水、用肥等，从而实现病害的发生。物理防治是指利用病虫对温度、湿度、光谱、颜色、声音等的反应来控制病虫的发生，杀死、驱避或隔离害虫。化学防治是用化学药剂的毒性来防治病虫害，具有防治效果好、收效快、使用方便、受季节性影响较小、适宜于大面积使用等优点，但如果使用不当，可引起人畜中毒、污染环境、杀伤天敌和造成药害；长期使用化学农药，可使某些病虫害产生不同程度的抗性。生物防治是指利用病虫害的生物天敌或有益生物制品防治茄科蔬菜病虫害的方法。主要方法有以虫治虫、以菌治虫、以病毒治虫、用其他有益生物制剂防治病虫害等。生物防治不污染环境，对人畜安全，一旦成功，可持久发挥作用，达到防治茄科蔬菜病虫害的目的。生物防治的目标往往很具体或专一性较强，但见效时间较慢。
3、一般而言，农业防治和物理防治受限于具体的栽种环境，不适于规模化推广应用。虽然化学药剂易于规模生产且在各种环境下的普适性较强，但容易发生环境污染以及存在安全隐患。因此，近年来，人们将研究的目光重点放在生物防治技术方面，并获得了一些令人鼓舞的成果，例如cn108293480b提供了利用生防菌剂防治番茄灰霉病的方法，其通过将康氏木霉-丝孢酵母混合发酵液和施氏假单胞菌培养液按照3:2的体积比混合均匀，然后真空冷冻干燥制得菌粉，并将菌粉添加至水中对番茄进行喷洒，实现了对番茄灰霉病的有效防治，防治效果达到80％以上；再如，cn112493256b提供了一种促进番茄生长和防治番茄炭疽病的绿僵菌制剂，其发现绿僵菌cqma421对于番茄炭疽病具有良好的防治效果，田间试验下的发病率仅为6％，防效可达到70％以上；又如，cn112640916b提供了微生物制剂在防治番茄青枯病中的应用，其通过将杰米拉类芽孢杆菌w51与吸附剂组成微生物制剂，对番茄青枯病实现了79.35％的防效。
4、不过，包括上述发明专利在内的生物防治技术，通常仅能针对1种病害具有较好的防效，缺乏广谱性，而作物在栽培过程中，通常无法避免被多种病害影响，因此，造成这些技术缺乏较好的推广应用价值。
技术实现思路
1、针对现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种可以对番茄多种土传病害具有优异防效的生防技术，具体提供对于番茄多种土传病害的广谱生防制剂及其制备方法和应用。
2、为了实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：
3、一种防治番茄土传病害的广谱生防制剂的制备方法，该制备方法包括如下步骤：
4、(1)按菌体数目比1:1～2，将解淀粉芽孢杆菌的菌粉和萎缩芽孢杆菌的菌粉混合，得到菌体混合物，然后再与施氏假单胞菌的培养物冻干粉混合均匀，菌体混合物与施氏假单胞菌的培养物冻干粉的重量比为1:2～3；
5、(2)将步骤(1)所得的混合物加至水中，使得混合物的重量比为2～3％；
6、所述解淀粉芽孢杆菌的保藏号为cgmcc no.3789；所述萎缩芽孢杆菌的保藏号为cctcc no：m2010316；所述施氏假单胞菌的保藏号为atcc 17588；所述解淀粉芽孢杆菌的菌粉为通过对解淀粉芽孢杆菌培养液进行离心取菌体沉淀进行冻干所得物；所述萎缩芽孢杆菌的菌粉为通过对萎缩芽孢杆菌培养液进行离心取菌体沉淀进行冻干所得物；所述施氏假单胞菌的培养物冻干粉为通过对施氏假单胞菌培养液进行离心取上清液并冻干后所得物。
7、优选地，所述土传病害包括番茄青枯病、灰霉病或晚疫病中的至少一种。
8、优选地，制备所述解淀粉芽孢杆菌培养液时，所用的培养基的制备方法为：称取胰蛋白胨5g、酵母膏5g、葡萄糖5g，放入1000ml三角瓶中，充分混匀后将ph调整至6.8-7.2，1000ml三角瓶中装量为300ml培养液，用塞子塞好三角瓶口，121℃湿热灭菌30分钟，冷却后备用。
9、优选地，制备所述萎缩芽孢杆菌培养液时，所用的培养基配方为：葡萄糖1.5％w/w、大豆粉饼1.5％w/w、氯化钠1％w/w，其余为水。
10、优选地，制备所述施氏假单胞菌培养液时，所用的培养基配方为：玉米淀粉12g/l、酵母提取物10g/l、氯化钠5g/l、尿素2g/l、磷酸二氢钾、0.1g/l、磷酸氢二钾0.1g/l、硫酸亚铁0.01g/l、硫酸锰0.01g/l，其余为水。
11、作为一个优选技术方案，一种防治番茄土传病害的广谱生防制剂的制备方法，包括如下步骤：
12、(1)按菌体数目比1:1，将解淀粉芽孢杆菌的菌粉和萎缩芽孢杆菌的菌粉混合，得到菌体混合物，然后再与施氏假单胞菌的培养物冻干粉混合均匀，菌体混合物与施氏假单胞菌的培养物冻干粉的重量比为1:3；
13、(2)将步骤(1)所得的混合物加至水中，使得混合物的重量比为2％。
14、本发明的另外一个目的在于提供由上述方法制备得到的一种防治番茄土传病害的广谱生防制剂。
15、本发明还有一个目的在于提供上述一种防治番茄土传病害的广谱生防制剂在在防治番茄作物病害方面的应用。
16、可选地，所述生防制剂在应用时，施用方法包括叶面喷施和灌根。
17、如本发明实施例所示，本发明通过将解淀粉芽孢杆菌的菌粉、萎缩芽孢杆菌的菌粉与施氏假单胞菌的培养物冻干粉混合，获得了一种可以对番茄多种病害具有优异防治效果的制剂。在本发明之前，本发明所述施氏假单胞菌在cn 108293480 b中有所应用，其主要通过与康氏木霉和丝孢酵母发酵液混合来产生对番茄灰霉病的防治效果，不过当单独用施氏假单胞菌发酵液(含菌体)时，对于番茄灰霉病的防治效果有限。本发明通过摸索发现，当用施氏假单胞菌的培养物(不含菌体)与解淀粉芽孢杆菌的菌粉和萎缩芽孢杆菌的菌粉混合，可以产生优异的防治效果，但是将施氏假单胞菌的培养物替换为施氏假单胞菌菌体后，则相应防治效果出现明显下降。这表明，施氏假单胞菌的培养物与解淀粉芽孢杆菌的菌粉和萎缩芽孢杆菌的菌粉均有协同作用。
18、本发明所述的解淀粉芽孢杆菌最初报道于cn 101985608 b，用于防治水稻细菌性条斑病。本发明人将其用作番茄土传病害的防治时，效果并不理想，防效不超过50％，见对比实施例3(见表1和表2各自的实验组6)。本发明所述的萎缩芽孢杆菌最初报道于cn102559533b，用于拮抗海参病原菌，据发明人所知，尚未有利用该菌用于作物土传病害防治的报道。见对比实施例2和4所示，无论是单独用本发明所述萎缩芽孢杆菌还是将其与本发明所述解淀粉芽孢杆菌组合，在番茄土传病害的防治上，均未能取得令人满意的效果，甚至出现轻度拮抗的作用。
19、本发明有益效果：
20、本发明的生防制剂可以对多种番茄土传病害具有优异的防效，作物的发病率普遍较低；同时，本发明生防制剂的制备过程简单，易于规模化生产，具有较好的推广价值。
1.一种防治番茄土传病害的广谱生防制剂的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述土传病害包括番茄青枯病、灰霉病或晚疫病中的至少一种。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，制备所述解淀粉芽孢杆菌培养液时，所用的培养基的制备方法为：称取胰蛋白胨5g、酵母膏5g、葡萄糖5g，放入1000ml三角瓶中，充分混匀后将ph调整至6.8-7.2，1000ml三角瓶中装量为300ml培养液，用塞子塞好三角瓶口，121℃湿热灭菌30分钟，冷却后备用。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，制备所述萎缩芽孢杆菌培养液时，所用的培养基配方为：葡萄糖1.5％w/w、大豆粉饼1.5％w/w、氯化钠1％w/w，其余为水。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，制备所述施氏假单胞菌培养液时，所用的培养基配方为：玉米淀粉12g/l、酵母提取物10g/l、氯化钠5g/l、尿素2g/l、磷酸二氢钾、0.1g/l、磷酸氢二钾0.1g/l、硫酸亚铁0.01g/l、硫酸锰0.01g/l，其余为水。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：
7.一种防治番茄土传病害的广谱生防制剂，其特征在于，所述生防制剂由权利要求1～6任一项所述的制备方法制备而得。
8.权利要求7所述的一种防治番茄土传病害的广谱生防制剂在防治番茄土传病害方面的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述生防制剂在应用时，施用方法包括叶面喷施和灌根。
