一种阿克曼氏菌菌粉及其制备方法

专利2025-12-19  18


本发明涉及益生菌,具体涉及一种阿克曼氏菌菌粉及其制备方法。


背景技术:

1、阿克曼氏菌(akkermansia muciniphila),也称为akk菌,是一种从人类粪便中分离出来的椭圆形革兰氏阴性细菌。它属于疣微菌门,具有独特的形态和生态功能。近年来,研究发现阿克曼氏菌在促进肠道健康、改善代谢功能等方面具有显著作用。例如,阿克曼氏菌能促进肠干细胞增殖,缓解肠炎;在超重或肥胖者中,肠道中阿克曼菌的丰度较高者具有更好的改善胰岛素抵抗效果;阿克曼菌还能促进黏液分泌,增强肠道黏膜屏障,降低血液脂多糖的表达,改善高脂饮食喂养小鼠的代谢功能。

2、随着科技的不断进步,人们对益生菌的认识逐渐深入,肠道健康也受到了越来越多的关注,从而推动了益生菌市场规模的持续扩大。益生菌产品,无论是用于临床还是市场销售,都面临着储存这一重要问题。只有确保足够的益生菌剂量,才能发挥其对宿主的有益作用。因此,将益生菌制备成菌粉成为了一个理想的解决方案。这种制备方式不仅方便储存、稳定性高,还能减少储存体积,便于保存和运输,为客户提供了更大的便利。益生菌干燥技术作为一种简便经济的技术,受到了广泛应用。该技术的主要目的是去除益生菌菌体及其培养物中的水分。

3、传统的益生菌粉的制备需要将菌体培养后与培养基离心分离,洗净潜在风险的培养基后再加入干燥保护剂进行干燥保存。对于阿克曼氏菌来说,传统的菌粉制备工艺会带来让厌氧菌失活的风险,同时繁杂的操作对生产工艺的洁净度以避免染菌是一个很大的考验。


技术实现思路

1、为解决上述问题,本发明提供一种阿克曼氏菌菌粉及其制备方法,可提供活菌数高的阿克曼氏菌菌粉。

2、本发明在一方面提出了一种阿克曼氏菌菌粉,其包括:阿克曼氏菌和阿克曼氏菌的发酵培养基,所述阿克曼氏菌菌粉是所述阿克曼氏菌接种于所述发酵培养基中培养后,直接冷冻干燥制得;所述发酵培养基的氮源为乳清蛋白。

3、根据本发明的一种阿克曼氏菌菌粉,其采用可食用的乳清蛋白作为阿克曼氏菌的发酵培养基的氮源,使得阿克曼氏菌的发酵培养基为可食用培养基,通过阿克曼氏菌在该培养基中培养后,直接进行冷冻干燥制得阿克曼氏菌菌粉,培养物和菌体无需分离,有效地避免了菌种的损伤,使最终制备的菌粉的菌体存活率显著的提升。

4、可选地,所述发酵培养基为:乳清蛋白75~250g/l,半胱氨酸0.7-0.9g/l,nahco33~5g/l,kh2po4 0.3~0.5g/l、na2hpo4·12h2o 1.3~1.4g/l和葡萄糖10-25g/l。

5、可选地,所述乳清蛋白的浓度为222g/l。

6、本发明在另一方面提出了一种阿克曼氏菌菌粉的制备方法,其包括:

7、(1)将阿克曼氏菌株接种于种子培养基中,经两次复苏后接种于所述发酵培养基中培养,得到阿克曼氏菌发酵培养物;所述发酵培养基是经灭菌后形成的半固体状态的培养基;

8、(2)将所述阿克曼氏菌发酵培养物进行真空冷冻干燥,即得所述阿克曼氏菌菌粉。

9、根据本发明实施例的一种阿克曼氏菌菌粉的制备方法,该方法将将阿克曼氏菌接种于灭菌后形成的半固体培养基进行培养,将得到的培养物和菌体直接进行真空冷冻干燥制备菌粉,所获得菌粉的阿克曼氏菌的存活率相比于传统分离冷冻干燥,得到显著提升;并且降低操作难度和染菌风险,适合工业化培养。

10、可选地,步骤(1)中,所述培养为厌氧培养,接种量为8-16%,培养温度35-38℃,转速90-110rpm,初始ph控制在7.5-7.9。

11、可选地,步骤(2)中,真空冷冻干燥为:将所述阿克曼氏菌发酵培养物置于-20℃下预冻3h,再于真空度54pa的真空冷冻干燥机上冷冻干燥24h。

12、可选地,步骤(1)为:将阿克曼氏菌株接入bhi培养基中,35-38℃,90-110rpm下培养15-24h后为一级种子液,取一级种子液接种于bhi培养基中,35-38℃,90-110rpm下培养15-24h后为二级种子液,将所述二级种子液接种于所述发酵培养基中培养。

13、可选地,所述阿克曼氏菌为atcc baa-835嗜黏蛋白阿克曼氏菌akkermansiamuciniphila。

14、本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出,部分将从下面的描述中变得明显,或通过本发明的实践了解到。



技术特征:

1.一种阿克曼氏菌菌粉,其特征于,包括:阿克曼氏菌和阿克曼氏菌的发酵培养基,所述阿克曼氏菌菌粉是所述阿克曼氏菌接种于所述发酵培养基中培养后,直接冷冻干燥制得;所述发酵培养基的氮源为乳清蛋白。

2.如权利要求1所述的阿克曼氏菌菌粉,其特征在于,所述发酵培养基为:乳清蛋白75~250g/l,半胱氨酸0.7-0.9g/l,nahco3 3~5g/l,kh2po4 0.3~0.5g/l、na2hpo4·12h2o1.3~1.4g/l和葡萄糖10-25g/l。

3.如权利要求1或2所述的阿克曼氏菌菌粉,其特征在于,所述乳清蛋白的浓度为222g/l。

4.一种如权利要求1-3中任一项所述的阿克曼氏菌菌粉的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

5.如权利要求4所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)中,所述培养为厌氧培养,接种量为8-16%,培养温度35-38℃,转速90-110rpm,初始ph控制在7.5-7.9。

6.如权利要求4所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,真空冷冻干燥为:将所述阿克曼氏菌发酵培养物置于-20℃下预冻3h,再于真空度54pa的真空冷冻干燥机上冷冻干燥24h。

7.如权利要求4所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)为:将阿克曼氏菌株接入bhi培养基中,35-38℃,90-110rpm下培养15-24h后为一级种子液,取一级种子液接种于bhi培养基中,35-38℃,90-110rpm下培养15-24h后为二级种子液,将所述二级种子液接种于所述发酵培养基中培养。

8.如权利要求4所述的制备方法,其特征在于,所述阿克曼氏菌为atcc baa-835嗜黏蛋白阿克曼氏菌akkermansia muciniphila。


技术总结
本发明公开了一种阿克曼氏菌菌粉及其制备方法,该阿克曼氏菌菌粉包括:阿克曼氏菌和阿克曼氏菌的发酵培养基,所述阿克曼氏菌菌粉是所述阿克曼氏菌接种于所述发酵培养基中培养后,直接冷冻干燥制得;所述发酵培养基的氮源为乳清蛋白。该菌粉采用可食用的乳清蛋白作为阿克曼氏菌的发酵培养基的氮源,使得阿克曼氏菌的发酵培养基为可食用培养基,通过阿克曼氏菌在该培养基中培养后,直接进行冷冻干燥制得阿克曼氏菌菌粉,培养物和菌体无需分离,有效地避免了菌种的损伤,使最终制备的菌粉的菌体存活率显著的提升,并降低菌粉制作的操作难度和染菌风险,适合工业化培养。

技术研发人员:凌雪萍,吴雪君,卢英华,姚传义,陈翠雪
受保护的技术使用者:厦门大学
技术研发日:
技术公布日:2024/12/17
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