本发明属于兽药，具体涉及一种蛋禽用水溶性桂枝挥发油溶液及其制备方法和应用。
背景技术：
1、肠炎、输卵管炎是在家禽养殖，特别是蛋鸡养殖的过程中绕不开的两座大山，一年四季都可发生，但以夏季发病率最高。而炎症多发于饲养环境卫生差、管理水平低的鸡场。导致家禽肠炎和输卵管炎的致病因素很多，细菌感染常被作为引发的主要因素，呈全世界流行，临床以大肠杆菌、沙门氏菌、魏氏梭菌等感染最为常见，对养殖业危害较大。该病多由致病菌经口腔而感染，当饲料或饮水中微生物含量超标时便容易发生。
2、细菌性肠炎发生后，病鸡通常会表现精神不振、呆立、双翅下垂、闭眼缩颈、不愿走动等，随着发病时间增长，会出现消瘦，鸡冠苍白，采食量下降，拉水样稀便或者饲料样粪便，严重的会拉深褐色或者红色胡萝卜样的粪便。细菌感染后一方面会降低机体对营养的吸收，破坏肠绒毛表面，减少绒毛吸收养分的表面积，造成营养缺乏和饲料的浪费，阻碍鸡群正常生产，蛋鸡产蛋性能、蛋重、蛋品质均会受到严重影响。另一方面影响鸡群肠道的免疫功能，增加病毒感染概率，造成大量死淘。
3、细菌性输卵管炎在蛋鸡中发生概率很高，轻者表现不明显；严重者呆立，双翅下垂，企鹅状站立；蛋鸡无产蛋高峰，蛋壳质量差，薄壳蛋、软壳蛋、砂皮蛋增多，蛋壳上常带血迹；肛门红肿，从泄殖腔内排出输卵管内的黄、白色脓样分泌物，污染肛门周边羽毛；翻肛检查，输卵管口有条状或点状、紫红色出血。输卵管发炎后主要危害为卵泡发育不规律，导致产蛋性能的下降和产蛋周期的延长。输卵管炎还会导致蛋白分泌的减少，造成鸡蛋小、蛋重轻，影响养殖经济效益。此外还能引起腹膜炎和呼吸道症状的继发感染。
4、据大数据统计显示，全球约76.1％的鸡群会发生肠炎或输卵管炎，细菌性肠炎导致家禽养殖业年损失超过20亿元，输卵管炎影响蛋鸡每个生产周期损失36.46元/只，因此采取有效防控措施，应对鸡群越来越严重的细菌性感染具有重要意义。
5、目前药物治疗主要以抗生素为主，细菌性肠炎主要使用氨基糖苷类药物如庆大霉素、新霉素阿米卡星、安普霉素等；喹诺酮类药物恩诺沙星，甲硝唑；细菌性卵管炎则主要使用大观霉素、盐酸林可霉素、多西环素、阿莫西林、恩诺沙星，环丙沙星、左氧氟沙星；头孢克洛等头孢菌素类。对于处于产蛋期的蛋鸡，多种常规抗生素使用均会受到严格限制，直接影响生产效益；另一方面，抗生素的过量使用导致耐药性普遍升高，长此以往，常规治疗方案的有效率会大打折扣，增加养殖成本。因此，亟待开发具有高抑菌活性的抗生素替代药物用于肠炎/输卵管炎防控。
6、近年来，植物精油因其高抑菌活性被广泛关注，其是以植物根、茎、叶、花和果实等为原料，通过水蒸气蒸馏、溶剂提取和超临界co2流体萃取等方法提取出来的活性物质，其具有一定芳香气味，代表成分如百里香酚、香芹酚、肉桂醛等。肉桂醛为桂枝中提取的挥发油中主要成分，其被作为天然的抗菌物质，具有无残留、无抗药性的特点，对动物机体健康、提高生产性能有非常明显的效果。例如，已有专利公开了一种饲料用抗菌促生长复合添加剂及其制造方法和应用，其原料中包含肉桂油和百里香酚20％～30％，对常见革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均具有较强抑菌杀菌作用，对畜禽有显著防病、促生长作用，可以有效替代养殖过程中使用的抗生素。也有专利公开了一种用于抑制肉鸽常见病原菌的精油，其中肉桂精油也表现出对禽常见致病菌(大肠杆菌、沙门氏菌等)均有较强抑菌活性。
7、通过对现有技术的分析后发现，大多数已公开的专利中均是直接购买的桂枝挥发油原料，一方面对其来源不清晰，另一方面也很难控制使用成本，而桂枝挥发油的提取纯化工艺鲜有报道；另一方面按照专利公开的精油配方制备后，模拟临床使用很难完全水溶形成澄清溶液，对于蛋禽规模化养殖场的应用造成很大困难。针对这些问题，迫切需要开发一种性价比高、得率高的桂枝挥发油提取工艺，并对提取后的桂枝挥发油进行乳化配制，让其迅速水溶实现水线给药成为现实，既能够控制产品成本，又能满足实际养殖生产工作的需要，对推动产蛋期肠炎/输卵管炎治疗具有重要意义。
8、因此，特提出本技术。
技术实现思路
1、本发明旨在至少解决上述现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提出一种蛋禽用水溶性桂枝挥发油溶液及其制备方法，能够用于防治蛋禽肠炎/输卵管炎，临床应用预防效果明显，治疗起效快、治愈率高，且对生产无明显副作用。
2、本发明第一方面的目的，在于提供一种水溶性桂枝挥发油溶液。
3、本发明第二方面的目的，在于提供本发明第一方面的水溶性桂枝挥发油溶液的制备方法。
4、本发明第三方面的目的，在于提供一种药物。
5、本发明第四方面的目的，在于提供本发明第一方面的水溶性桂枝挥发油溶液和/或本发明第三方面的药物的应用。
6、本发明第五方面的目的，在于提供一种产品。
7、为了实现上述目的，本发明所采取的技术方案是：
8、本发明的第一个方面，提供一种水溶性桂枝挥发油溶液，包括以下组分：桂枝挥发油、防腐剂、乳化剂、助乳化剂和抗氧化剂。
9、在本发明一些实施方式中，按质量份计，所述水溶性桂枝挥发油溶液包括桂枝挥发油8～20份、防腐剂0.01～0.5份、乳化剂20～37份、助乳化剂20～45份和抗氧化剂0.0001～0.7份。
10、在本发明一些优选实施方式中，按质量份计，所述水溶性桂枝挥发油溶液包括桂枝挥发油8～15份、防腐剂0.01～0.1份、乳化剂20～30份、助乳化剂20～35份和抗氧化剂0.0001～0.7份。
11、在本发明一些实施方式中，所述乳化剂包括吐温，更优选地，所述乳化剂包括聚氧乙烯氢化蓖麻油或聚氧乙烯硬脂酸酯；最佳地，所述乳化剂为聚氧乙烯氢化蓖麻油。
12、在本发明一些实施方式中，所述助乳化剂包括聚甘油酯、甘油、乙二醇、二乙二醇单乙醚中至少一种；优选所述助乳化剂为聚甘油酯和二乙二醇单乙醚。
13、在本发明一些实施方式中，所述抗氧化剂包括二丁基羟基甲苯、亚硫酸氢钠、叔丁基对苯二酚中至少一种。
14、在本发明一些优选实施方式中，所述抗氧化剂包括二丁基羟基甲苯、亚硫酸氢钠和叔丁基对苯二酚中至少两种。
15、在本发明一些更优选实施方式中，所述抗氧化剂为二丁基羟基和亚硫酸氢钠的组合。
16、在本发明一些实施方式中，所述水溶性桂枝挥发油溶液包括桂枝挥发油10～12份、聚甘油酯10～12份、聚氧乙烯氢化蓖麻油20～25份、二乙二醇单乙醚11～15份、柠檬酸0.03～0.08份、二丁基羟基甲苯0.01～0.15份和亚硫酸氢钠0.15～0.25份。
17、在本发明一些实施方式中，所述水溶性桂枝挥发油溶液还包括水10～15份。
18、在本发明一些实施方式中，所述桂枝挥发油由包括以下方法制备得到：
19、对桂枝水溶液进行复合酶酶解处理，收集酶解液；
20、使用超临界co2萃取法与溶剂法或蒸馏法对酶解液进行提取，浓缩，即得到桂枝挥发油。
21、在本发明一些实施方式中，所述复合酶的添加量为桂枝质量的2％～4％。
22、在本发明一些实施方式中，所述复合酶的添加量为桂枝质量的3％。
23、在本发明一些实施方式中，所述复合酶包括纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶和木聚糖酶。
24、在本发明一些实施方式中，所述纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶和木聚糖酶的酶活力为8～15万u/g。
25、在本发明一些实施方式中，所述纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶和木聚糖酶的酶活力分别为9万u/g、10万u/g、9万u/g和12万u/g。
26、在本发明一些实施方式中，所述纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶和木聚糖酶的质量比为0.5～2:1:0.5～3:1～2。
27、在本发明一些优选实施方式中，所述纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶和木聚糖酶的质量比为0.5～2:1:0.5～3:1～2。
28、在本发明一些优选实施方式中，所述纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶和木聚糖酶的质量比为1～2:1:2～3:1。
29、在本发明一些更优选实施方式中，所述纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶和木聚糖酶的质量比为1:1:2:1。
30、在本发明一些实施方式中，所述复合酶酶解处理的条件为ph值4.5～5.5，水分30％～40％，温度45℃～50℃，时间0.5h～2h。
31、在本发明一些优选实施方式中，所述复合酶酶解处理的条件为ph值4.5～5.0，水分35％～40％，温度45℃～48℃，时间1h～1.5h。
32、在本发明一些更优选实施方式中，所述复合酶酶解处理的条件为ph值4.6～4.8，水分35％～40％，温度45℃～48℃，时间0.5h～1.5h。
33、在本发明一些实施方式中，所述超临界co2萃取的条件为萃取压力25～35mpa、萃取温度40～45℃、萃取时间为0.5～3h、co2流量为20～25l/h。
34、在本发明一些优选实施方式中，所述超临界co2萃取的条件为萃取压力25～30mpa、萃取温度40～45℃、萃取时间为1～3h、co2流量为20～25l/h。
35、在本发明一些更优选实施方式中，所述超临界co2萃取的条件为萃取压力28～30mpa、萃取温度41～43℃、萃取时间为1～2h、co2流量为23～25l/h。
36、在本发明一些实施方式中，所述溶剂法中的溶剂为乙醇。
37、在本发明一些实施方式中，所述溶剂法的条件为乙醇浓度为50％～70％、乙醇用量为药材重量的10～20倍，提取时间为1～3h。
38、在本发明一些优选实施方式中，所述溶剂法的条件为乙醇浓度为60％～70％、乙醇用量为药材重量的10～15倍，提取时间为1～2h。
39、在本发明一些更优选实施方式中，所述溶剂法的条件为乙醇浓度为60％～70％、乙醇用量为药材重量的10～12倍，提取时间为1～2h。
40、在本发明一些实施方式中，所述蒸馏法的条件为蒸馏温度88～100℃，蒸馏时间为3～5h。
41、在本发明一些实施方式中，使用超临界co2萃取法与溶剂法或蒸馏法对所述酶解液进行提取，浓缩，即得到桂枝挥发油。
42、在本发明一些实施方式中，所述浓缩可使用包括但不限于真空浓缩、减压浓缩等常规方法进行浓缩。
43、本发明通过复合酶酶解联合超临界co2萃取技术能够更大限度促进桂枝挥发油的提取和收集。
44、在本发明一些实施方式中，所述水溶性桂枝挥发油溶液的粒径10～80nm。
45、本发明的第二个方面，提供本发明第一方面的水溶性桂枝挥发油溶液的制备方法，包括以下步骤：
46、将抗氧剂、防腐剂和助乳化剂混合，得到混合溶液a；
47、混合溶液a与乳化剂混合，得到混合溶液b；
48、混合溶液b与桂枝挥发油和水混合，乳化，即得到水溶性桂枝挥发油溶液。
49、在本发明一些实施方式中，所述乳化的条件为压力15000psi～80000psi，温度35℃～45℃，乳化时间10～70min。
50、在本发明一些实施方式中，所述乳化的条件为压力30000psi～70000psi，温度35℃～45℃，乳化时间30～60min。
51、在本发明一些实施方式中，所述乳化的条件为压力55000psi～60000psi，温度35℃～45℃，乳化时间30～50min。
52、本发明的第三个方面，提供一种药物，包括本发明第一方面的水溶性桂枝挥发油溶液。
53、在本发明一些实施方式中，所述药物包括药学上可用的辅料。
54、在本发明一些实施方式中，所述药学可接受的辅料包括填充剂、崩解剂、稀释剂、分散剂、赋形剂、稳定剂、润滑剂、粘合剂、湿润剂、矫味剂、助悬剂、溶剂、缓释剂、乳化剂、吸收促进剂、表面活性剂、防腐剂、色素、香精和溶剂中的至少一种。
55、在本发明一些实施方式中，所述填充剂选自淀粉、蔗糖、乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、微晶纤维素或葡萄糖等；所述粘合剂选自纤维素衍生物、藻酸盐、淀粉、水、糊精、明胶或聚乙烯吡咯烷酮等；所述崩解剂选自微晶纤维素、羟甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙基纤维素或交联羟甲基纤维素钠；所述润滑剂选自硬脂酸、聚乙二醇、碳酸钙、碳酸氢钠、微粉硅胶、滑石粉或硬脂酸镁：所述助悬剂选自微粉硅胶、蜂蜡、纤维素、固态聚乙二醇：所述润湿剂选自甘油、聚氧乙烯硬脂酸酯、氢化蓖麻油或卵磷脂：所述溶剂选自液态聚乙二醇、异丙醇、聚氧乙烯硬脂酸酯、甘油、丙二醇或植物油，所述植物油选自大豆油、蓖麻油、花生油、调和油等：所述表面活性剂选自十二烷基苯磺酸钠、硬脂酸、聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物、脂肪酸山梨坦或聚山梨(吐温)等：所述矫味剂选自阿斯巴甜、蔗糖素、香精、甜菊素、安赛蜜、柠檬酸或糖精钠；所述防腐剂选自对羟苯甲酸甲酯或对羟苯甲酸丙酯中的至少一种。
56、在本发明一些实施方式中，所述药物的剂型选自片剂(如普通片剂、双层片剂、多层片剂、缓释片剂、单室控释片剂、双室控释片剂、微孔型控释片剂、舌下含片、口腔速崩片、分散片、肠溶片)、丸剂、粉剂、混悬剂、凝胶、乳液、乳膏、颗粒剂、纳米颗粒、胶囊(如普通胶囊、缓释胶囊、控释胶囊、含有微丸或小片的胶囊、含有微丸或小片的ph依赖型胶囊、胃肠复合胶囊)、栓剂、注射剂、喷雾和针剂。
57、本发明的第四个方面，提供本发明第一方面的水溶性桂枝挥发油溶液和/或本发明第三方面的药物在(1)～(9)中至少一种中的应用：
58、(1)制备预防和/或治疗鸡肠炎的产品；
59、(2)制备预防和/或治疗鸡输卵管炎的产品；
60、(3)制备预防和/或治疗大肠杆菌感染引发的疾病的产品；
61、(4)制备预防和/或治疗沙门氏菌感染引发的疾病的产品；
62、(5)制备预防和/或治疗梭菌感染引发的疾病的产品；
63、(6)制备预防和/或治疗具有沙壳蛋、薄壳蛋、脏蛋临床症状的蛋鸡的产品；
64、(7)制备提高蛋鸡产蛋率、正品蛋率、蛋品质的产品；
65、(8)抑菌；
66、(9)制备抑菌产品。
67、在本发明一些实施方式中，(8)和(9)中的菌包括金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、大肠杆菌、梭菌中至少一种。
68、在本发明一些实施方式中，(1)和(2)中所述鸡包括蛋鸡。
69、本发明的第五个方面，提供一种产品，包括本发明第一方面的水溶性桂枝挥发油溶液或本发明第三方面的药物。
70、在本发明一些实施方式中，所述产品包括但不限于试剂、试剂盒和药物。
71、本发明的有益效果是：
72、本发明中的水溶性桂枝挥发油溶液具有较强体外抑菌功效，能够有效防治蛋禽肠炎和输卵管炎，改善临床稀粪症状，减少输卵管炎引起的沙壳蛋、软壳蛋等，提升正品蛋率，延长产蛋高峰。
73、本发明对桂枝挥发油进行了高压均质乳化处理，实现桂枝挥发油具有水溶性，更加便捷用于临床养殖中的水线给药，更容易被养殖户接受，尤其是在产蛋期发挥对抗生素替代性的抗菌消炎作用，保障蛋禽养殖经济效益。
1.一种水溶性桂枝挥发油溶液，包括以下组分：桂枝挥发油、防腐剂、乳化剂、助乳化剂和抗氧化剂。
2.根据权利要求1所述的水溶性桂枝挥发油溶液，其特征在于，按质量份计，所述水溶性桂枝挥发油溶液包括桂枝挥发油8～20份、防腐剂0.01～0.5份、乳化剂20～37份、助乳化剂20～45份和抗氧化剂0.0001～0.7份。
3.根据权利要求1所述的水溶性桂枝挥发油溶液，其特征在于，所述乳化剂包括聚氧乙烯氢化蓖麻油、聚氧乙烯硬脂酸酯中至少一种；和/或，所述助乳化剂包括聚甘油酯、甘油、乙二醇、二乙二醇单乙醚中至少一种；和/或，所述抗氧化剂包括二丁基羟基、亚硫酸氢钠、叔丁基对苯二酚中至少一种；和/或，所述防腐剂包括柠檬酸、苯甲酸钠、山梨酸钾中至少一种。
4.根据权利要求1～3中任一项所述的水溶性桂枝挥发油溶液，其特征在于，所述桂枝挥发油由包括以下方法制备得到：
5.根据权利要求4所述的水溶性桂枝挥发油溶液，其特征在于，所述超临界co2萃取的条件为萃取压力25～35mpa、萃取温度40～45℃、萃取时间为0.5～3h、co2流量为20～25l/h；
6.权利要求1～5中任一项所述的水溶性桂枝挥发油溶液的制备方法，包括以下步骤：将抗氧剂、防腐剂和助乳化剂混合，得到混合溶液a；
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述乳化的条件为压力15000psi～80000psi，温度35℃～45℃，乳化时间10～70min。
8.一种药物，包括权利要求1～5中任一项所述的水溶性桂枝挥发油溶液。
9.权利要求1～5中任一项所述的水溶性桂枝挥发油溶液和/或权利要求8所述的药物在(1)～(9)中至少一种中的应用：
10.一种产品，包括权利要求1～5中任一项所述的水溶性桂枝挥发油溶液或权利要求8所述的药物。
