本发明涉及有机化合物制备，具体为一种有机化合物cytochalasin d的制备方法。
背景技术：
1、cytochalasin d是肌动蛋白聚合的选择抑制剂，其ic50值为25nm。可以来源于真菌，cytochalasin d具有细胞渗透活性，cytochalasin d通过结合g-actin抑制g-actin-cofilin的相互作用，cytochalasin d还能抑制cofilin与f-actin的结合，降低了活细胞中肌动蛋白聚合和解聚的速率。cytochalasin d可以减少外泌体的释放，进而减少肿瘤环境中survivin的量，cytochalasin d诱导yap磷酸化，阻止其核易位保留在胞质中。细胞松弛素d(一种天然代谢产物)可调节间叶干细胞基因的表达，从而将其向成骨细胞方向分化。通过对干细胞加以细胞松弛素d的刺激，这些干细胞能够分化为成骨细胞，之后，将细胞松弛素d向小鼠骨髓组织间隙注射能够引起骨骼的再生。
2、相对于现有的制备方法技术要想在更快的时间获得纯度高、收率高的cytochalasin d是非常困难的，并且，随着人们对cytochalasin d的需求越来越多，cytochalasin d的价格是非常昂贵的。因此，用合适的制备方法能在更快的时间获得纯度高、收率高的cytochalasin d是非常有必要的。而要在短时间内获得更多的cytochalasind主要来源于s5步骤中目标产物分离中的一步，在这一步中用fr.5.8(22.2342g)过c18在甲醇水50％的等度条件下就可直接获得纯度高、收率高目标产物cytochalasin d，在该步中，也可以直接用液相制备出目标产物，但是使用液相制备所消耗的时间太长，并且会损失更多的样品，还会消耗更多的分析甲醇，所需成本变高。
技术实现思路
1、针对现有技术的不足，本发明提供了一种有机化合物cytochalasin d的制备方法，解决了现有的制备方法技术要想获得纯度高、收率高的cytochalasin d非常困难的问题。
2、为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：一种有机化合物cytochalasin d的制备方法，具体包括以下步骤：
3、s1.菌种的活化与扩代
4、从甘油水冻存管中解冻内生真菌炭角菌(sy4)，移入psa培养基，于28℃恒温培养20天，获得菌丝体；
5、s2.菌种大米扩大培养与提取
6、将二代菌株移入含15kg大米的固体培养基，进行规模发酵30天，用等体积乙酸乙酯提取6次，获得总浸膏500g，总浸膏通过大孔树脂初步划段，使用甲醇水梯度洗脱(0％、30％、60％、90％)，获得浸膏120g用于下一步分离；
7、s3.cytochalasind初步分离
8、使用硅胶柱对浸膏120g进行划段，以二氯甲烷：甲醇为流动相，梯度洗脱(200:1到1:1)，获得15段(fr.1-fr.15)；
9、s4.进一步划段
10、对fr.5(33.3323g)进行硅胶柱再次划段，以石油醚：丙酮转氯仿：甲醇为流动相，梯度洗脱(8:1到4:1转75:1到1：1)，获得9段(fr.5.1-fr.5.9)；
11、s5.目标产物分离
12、fr.5.8(22.2342g)过c18柱，以甲醇水为流动相，梯度洗脱(50％到100％)，获得10段(fr.5.8.1-fr.5.8.10)，其中fr.5.8.8为目标产物cytochalasind，质量为4.8796g。
13、本发明提供了一种有机化合物cytochalasin d的制备方法。具备以下有益效果：
14、本发明提供了一种有机化合物cytochalasin d的制备方法，本发明的cytochalasind制备方法相较于现有技术能够在更短时间内获得高纯度、高收率的cytochalasind，具体来说，通过fr.5.8段(22.2342g)的c18柱分离，在甲醇水50％的等度条件下即可直接获得高纯度、高收率的目标产物cytochalasind，质量达到4.8796g，这一步的优化使得产物的纯度和收率显著提高，满足了市场对高质量cytochalasind的需求，传统方法在短时间内很难获得大量高纯度的cytochalasind，而本发明方法在优化的条件下可以快速分离出目标产物，采用甲醇水50％等度条件的c18柱分离方法，既节省了时间，又提高了效率，相较于液相制备方法，虽然液相也可以得到目标产物，但时间较长且样品损失和成本较高，而本方法则有效避免了这些问题，在制备过程中，使用c18柱和甲醇水50％等度条件进行分离，大大减少了甲醇的消耗，同时避免了样品的过多损失，从而降低了整体成本，相较于液相制备方法，所需的时间和资源投入显著减少，使得生产更加经济高效，本发明在fr.5.8段(22.2342g)的c18柱分离过程中，采用甲醇水50％的等度条件，直接获得高纯度、高收率的cytochalasind，此优化步骤有效地简化了分离过程，提高了效率和产量，节省了时间和成本。
1.一种有机化合物cytochalasin d的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种有机化合物cytochalasin d的制备方法，其特征在于：所述步骤s1菌种的活化与扩代中需在28℃恒温培养20天，获得菌丝体。
3.根据权利要求1所述的一种有机化合物cytochalasin d的制备方法，其特征在于：所述步骤s2菌种大米扩大培养与提取的使用甲醇水梯度洗脱具体的为：
4.根据权利要求1所述的一种有机化合物cytochalasin d的制备方法，其特征在于：所述步骤s3 cytochalasind初步分离的梯度洗脱，获得15段具体的为：
5.根据权利要求1所述的一种有机化合物cytochalasin d的制备方法，其特征在于：所述步骤s4进一步划段中的梯度洗脱，获得9段具体的为：
6.根据权利要求1所述的一种有机化合物cytochalasin d的制备方法，其特征在于：所述步骤s5目标产物分离中梯度洗脱，获得10段具体的为：
