本发明涉及生物医药，具体涉及一种基于水凝胶微针的药物递送纳米颗粒制备方法。
背景技术：
1、移植排斥反应是器官移植术后面临的不可逾越的问题，目前所使用的抗排斥药可引起全身毒副作用，术后严重感染及代谢综合征的出现，成为器官移植患者术后死亡的重要因素；同时免疫抑制导致的肿瘤复发也成了棘手的问题。
2、雷公藤甲素(tp)具有强大的免疫抑制功能，在诱导器官移植免疫耐受方面取得了良好效果，且tp具有抗肿瘤效能，但由于其治疗窗狭窄、毒性风险大，临床应用受限。
技术实现思路
1、本发明的目的是为了解决上述问题，提供一种基于水凝胶微针的药物递送纳米颗粒制备方法。
2、为了达到上述目的，本发明的技术方案如下：
3、本发明提供了一种基于水凝胶微针的药物递送纳米颗粒制备方法，包括以下步骤：
4、步骤s1、在室温条件下，量取cacl2溶液于1000ml大烧杯中，再量取sds溶液200ml，在搅拌条件下快速混匀，溶液由澄清变为乳白色后继续搅拌加入的na2co3溶液400ml，溶液开始编委白色混悬溶液；
5、步骤s2、将白色混悬溶液用封口膜封于磁力搅拌器(1600r/min)，并用去离子水和无水乙醇分别洗涤3次，收集沉淀置于60℃烘箱中干燥1h，干燥后得到白色粉末状多孔空心纳米微球a；
6、步骤s3、称取tp标准品置于100ml锥形瓶中，加入20ml的甲醇溶液使其完全溶解，然后再精密称取a微球粉末0.3g放入锥形瓶中，用封口膜封住锥形瓶口，将其置于37℃台式恒温振荡箱中以150r/min的速率振荡，每隔2h测定一次tp的吸光度值；待其吸光度值几乎稳定时，tp的装载量已经达到饱和，此时停止振荡；
7、步骤s4、将装载tp的a纳米微球粉末通过离心分离收集沉淀(5500r/min)，用ph＝7.4的稀氨水和去离子水反复洗涤沉淀，以除去tp/caco3纳米微球表面上吸附的tp，再与抗体anti-dec205结合，得到caco3@lip@dec205纳米微球制剂；
8、步骤s5、制备pvp微针：配制聚乙烯吡咯烷酮溶液，取聚乙烯吡咯烷酮于玻璃试剂瓶中，加入去离子水，加热并搅拌至聚乙烯吡咯烷酮充分溶解；向六孔培养板中放置等量的pdms模具，向模具中滴入适量的聚乙烯吡咯烷酮溶液并保持两个六孔培养板的重量相等,选择每分钟4000转的速率进行5分钟的离心操作，取出两个六孔培养板，用胶头滴管补加数滴溶液，继续保持两个六孔培养板的重量相等，再次离心5分钟，重复操作4次；将所得培养板放在烘箱中温度设置为35摄氏度约12小时至溶液蒸干，则可从模具中取下所制备的微针。
9、本发明进一步设置为：所述步骤s1中cacl2溶液为0.1-0.5mol/l，sds溶液为0.1mol/l，na2co3溶液为0.1-0.5mol/l。
10、本发明进一步设置为：所述步骤s3中tp标准品质量为0.01-0.1g。
11、本发明进一步设置为：所述步骤s5中配制聚乙烯吡咯烷酮溶液的质量分数为5-15％，聚乙烯吡咯烷酮为10.0g，去离子水为100ml。
12、与现有技术相比，本方案的有益效果：碳酸钙生物矿物作为靶向载体具有独特的优势，其理想的生物相容性和生物可降解性，对人体无毒害，易于排出体外，较大的比表面积和负载各种药物的能力使其成为理想的药物载体。通过胞吞作用实现药物的靶向输送和释放。tp作为脂溶性药物，单独使用碳酸钙载药效果不理想，本发明加用脂质体使tp载药效率更高。同时纳米颗粒表面接靶向dcs的单克隆抗体anti-dec205，使进入体内的纳米颗粒靶向将tp递送到dcs发挥作用，从而减轻全身的毒副作用。
1.一种基于水凝胶微针的药物递送纳米颗粒制备方法，其特征是，包括以下步骤：
2.如权利要求1所述的一种基于水凝胶微针的药物递送纳米颗粒制备方法，其特征是：所述步骤s1中cacl2溶液为0.1-0.5mol/l，sds溶液为0.1mol/l，na2co3溶液为0.1-0.5mol/l。
3.如权利要求1所述的一种基于水凝胶微针的药物递送纳米颗粒制备方法，其特征是：所述步骤s3中tp标准品质量为0.01-0.1g。
4.如权利要求1所述的一种基于水凝胶微针的药物递送纳米颗粒制备方法，其特征是：所述步骤s5中配制聚乙烯吡咯烷酮溶液的质量分数为5-15％，聚乙烯吡咯烷酮为10.0g，去离子水为100ml。
