1.本文件涉及用于控制配体门控离子通道(lgic)活性的材料和方法。例如，本文件提供了经修饰的lgic，其包含至少一个lgic亚基，所述lgic亚基具有经修饰的配体结合域(lbd)和/或经修饰的离子孔域(ipd)。还提供了外源lgic配体，其可以结合并激活经修饰的lgic。在一些情况下，经修饰的lgic和外源配体可以用于治疗患有通道病(channelopathy)的哺乳动物(例如，神经通道病或肌肉通道病)。在一些情况下，经修饰的lgic和外源lgic配体可以用于调控(例如，激活或抑制)穿过哺乳动物细胞膜的离子转运。在一些情况下，经修饰的lgic和外源lgic配体可以用于调控(例如，增加或降低)哺乳动物中细胞的兴奋性。2.背景资料离子通道介导细胞中的离子通量，这极大地影响它们的生物学功能。这点的一个突出的实例是神经元，其中离子通道控制神经元之间的电信号传导，以影响生理学、感觉、行为、情绪和认知。不同的lgic具有不同的配体结合特性以及特定的离子电导特性(hille 2001 ionchannels of excitable membranes.pp.814.sunderland，ma：sinauer associates；kandel et al 2000 principles of neural science.usa：mcgraw-hill co.1414pp)。例如，烟碱乙酰胆碱受体(nachrs)结合内源配体乙酰胆碱(ach)，其激活阳离子的电导并且通常使细胞去极化，从而增加细胞兴奋性。相反，甘氨酸受体(glyr)结合内源配体甘氨酸，其激活氯离子电导，并且通常通过超极化和/或通过细胞膜电阻的电分流(electricalshunt)降低细胞的兴奋性。
背景技术：
：：0、发明
背景技术：
：实现思路1、内源lgic激动剂如ach的水平不易控制。2、本文件提供了用于控制lgic活性(例如，增加lgic对外源配体的敏感性和/或降低对内源配体如ach的敏感性)的材料和方法。例如，本文件提供了经修饰的lgic，其包含至少一个经修饰的lgic亚基，所述经修饰的lgic亚基具有lbd和ipd，并且具有至少一个经修饰的氨基酸(例如，氨基酸取代)。还提供了外源lgic配体，其可以结合并激活经修饰的lgic。在一些情况下，经修饰的lgic和外源配体可以用于治疗患有通道病(例如，神经通道病或肌肉通道病)的哺乳动物。在一些情况下，经修饰的lgic和外源lgic配体可以用于调控(例如，激活或抑制)穿过哺乳动物细胞膜的离子转运。在一些情况下，经修饰的lgic和外源lgic配体可以用于调控(例如，增加或降低)哺乳动物中细胞的兴奋性。3、具有控制lgic活性的能力提供了实现细胞中离子转运控制的独特且未实现的机会。例如，对一种或多种外源lgic配体具有增加的敏感性的经修饰的lgic可以用于基于外源lgic配体的递送提供离子转运和/或细胞兴奋性的时间和空间控制。例如，对内源lgic配体具有降低的敏感性的经修饰的lgic阻止经修饰的lgic的不希望的激活，并且允许通过外源配体选择性控制经修饰的lgic。此外，对经修饰的lgic具有增加的效力的外源lgic配体相对于内源离子通道改善经修饰的lgic的靶向选择性。因此，本文提供的经修饰的lcig和外源lgic配体可用于在减少小分子对非意图靶标的副作用的情况下实现治疗效果。4、如本文所述，经修饰的lgic中的一个或多个突变可以增强外源lgic配体的效力。相对于α7-glyr，残基l131处α7-glyr的α7lbd的突变(例如用gly或ala取代leu)增加伐伦克林(varenicline)(16倍)和托烷司琼(tropisetron)(3.6倍)的效力，而降低ach效力(-6.4倍)。在残基g175(例如g175k)或p216(例如p216i)处α7-glyr的α7lbd的突变增强ach、尼古丁、托烷司琼、伐伦克林以及其他喹核碱和莨菪烷激动剂的效力。将残基g175k处的突变与降低内源激动剂ach的效力的突变(例如y115f)组合产生对托烷司琼具有增加的效力(5.5倍)并且对ach具有降低的效力(-8倍)的α7-glyr y115f g175k。此外，组合α7lbd中这些嵌合通道中残基77(例如用phe或tyr取代trp)和/或79(例如用gly、ala或ser取代gln)和/或131(例如用gly或ala取代leu)和/或141(例如用phe或pro取代leu)处的突变与残基g175(例如g175k)或p216(例如p216i)处的效力增强突变增加独特配体的效力和/或降低ach效力。例如，含有具有残基79处的突变(例如用gly取代gln)、残基115处的突变(例如用phe取代tyr)、和残基175处的突变(例如用lys取代gly)的α7 nachr lbd(α7 lbd)的嵌合α7-glyrlgic相对于未修饰的嵌合α7-glyr lgic具有对外源莨菪烷lgic配体化合物723(莨菪烷)的大于100倍增加的敏感性和降低的ach敏感性(-15倍)。此外，经修饰的lgic对外源lgic配体，诸如喹核碱或莨菪烷具有几乎20倍增加的敏感性，所述经修饰的lgic包含至少一个嵌合lgic亚基，所述嵌合lgic亚基含有具有残基79处的突变(例如用ala、gly或ser取代gln)的α7nachr lbd(α7lbd)和具有残基298处的突变(例如用gly取代ala)的glyr ipd。α7lbd的残基27(例如用asp取代arg)和41(例如用arg取代glu)处的另外的突变降低经修饰的嵌合lgic与未修饰的离子通道的结合。α7 lbd的残基115(例如用phe取代tyr)、139(例如用gly或leu取代gln)、210(例如用phe取代tyr)、217(例如用phe取代tyr)、和/或219(例如用ala取代asp)处的另外的突变降低嵌合lgic对内源配体ach的敏感性。这些嵌合lgic允许对哺乳动物细胞中的细胞功能的高度选择性控制，而使与哺乳动物中内源信号传导系统的交叉响应性最小化。5、一般而言，本文件的一方面的特征在于经修饰的lgic，其具有至少一个经修饰的lgic亚基，所述经修饰的lgic亚基包含具有氨基酸修饰的lbd和ipd，其中外源lgic配体激活经修饰的lgic。经修饰的lgic可以是嵌合lgic，其具有来自第一lgic的lbd和来自第二lgic的ipd。lbd可以是α7烟碱乙酰胆碱受体(α7-nachr)lbd。权利要求3的经修饰的lgic，其中α7-nachr lbd中的至少一个经修饰的氨基酸包含选自下组的氨基酸残基处的氨基酸取代：α7-nachr lbd的残基77、79、131、139、141、175、和216。氨基酸取代可以在α7lbd的残基79处，并且氨基酸取代可以是q79a、q79g或q79s。例如，α7lbd的残基79处的氨基酸取代可以是q79g。ipd可以是血清素3受体(5ht3)ipd、甘氨酸受体(glyr)ipd、γ-氨基丁酸(gaba)受体ipd或α7-nachr ipd。ipd可以是glyr ipd，并且glyr ipd可以包括嵌合lgic的残基298处的氨基酸取代(例如，a298g取代)。ipd可以是gaba ipd，并且gaba ipd可以包含经修饰的lgic的残基298处的氨基酸取代(例如，w298a取代)。经修饰的lgic可以是嵌合lgic，其包含具有q79g氨基酸取代的α7lbd和具有a298g氨基酸取代的glyr ipd。外源lgic配体可以是合成的外源lgic配体，其选自下组：喹核碱、莨菪烷、9-氮杂二环[3.3.1]壬烷、6,7,8,9-四氢-6，10-亚甲基-6h-吡嗪并(2，3-h)苯丙氮卓和1，4-二氮杂二环[3.2.2]壬烷。当合成的外源lgic配体是莨菪烷时，莨菪烷可以是托烷司琼、假托烷司琼、去甲托烷司琼、化合物723、化合物725、化合物737或化合物745。当合成的外源lgic配体是喹核碱时，喹核碱可以是pnu-282987、pha-543613、化合物0456、化合物0434、化合物0436、化合物0354、化合物0353、化合物0295、化合物0296、化合物0536、化合物0676、或化合物702。当合成的外源lgic配体是6,7，8,9-四氢-6，10-亚甲基-6h-吡嗪并(2，3-h)苯丙氮卓时，配体可以是化合物765或化合物770。当合成的外源lgic配体是1,4-二氮杂二环[3.2。2]壬烷时，配体可以是化合物773或化合物774。在一些情况下，lbd可以是α7lbd，并且α7lbd还可以包括至少一个经修饰的氨基酸，其赋予相对于对未修饰的lgic的结合对另一个具有至少一个经修饰的氨基酸的α7lbd的选择性结合。未修饰的lgic可以是内源lgic(例如，内源α7-nachr)。赋予降低的对未修饰的lgic的结合的α7lbd中的至少一个经修饰的氨基酸可以包括残基27(例如，r27d取代)和/或残基41(例如e41r取代)处的氨基酸取代。在一些情况下，ipd可以是5ht3 ipd，并且5ht3ipd可以包括至少一个经修饰的氨基酸，其对经修饰的lgic赋予增加的离子电导。5ht3 ipd中对经修饰的lgic赋予增加的离子电导的至少一个经修饰的氨基酸可以包括在残基425(例如，r425q取代)、429(例如，r429d取代)和/或433(例如，r433a取代)处的氨基酸残基处的氨基酸取代。6、另一方面，本文文件的特征在于经修饰的lgic，其具有至少一个经修饰的lgic亚基，所述经修饰的lgic亚基包含具有至少一个经修饰的氨基酸的lbd和ipd，其中lbd中的至少一个经修饰的氨基酸减少与内源lgic配体的结合。经修饰的lgic可以是嵌合lgic，其具有来自第一lgic的lbd和来自第二lgic的ipd。内源lgic配体可以是ach。经修饰的lgic对ach可以具有大于20μm的ec50。至少一个经修饰的氨基酸可以包括在残基115、139、210、217和/或219处的氨基酸取代。当至少一个经修饰的氨基酸在残基115处包括氨基酸取代时，氨基酸取代可以是y115f取代。当至少一个经修饰的氨基酸在残基139处包含氨基酸取代时，氨基酸取代可以是q139g或q139l取代。当至少一个经修饰的氨基酸在残基210处包括氨基酸取代时，氨基酸取代可以是y210f取代。当至少一个经修饰的氨基酸在残基217处包括氨基酸取代时，氨基酸取代可以是y217f取代。当至少一个经修饰的氨基酸在残基219处包括氨基酸取代时，氨基酸取代可以是d219a取代。7、另一方面，本文件的特征在于对经修饰的配体门控离子通道(lgic)具有增加的效力的配体，其中配体包含式i：8、9、其中x1、x2和x3各自独立地为ch、ch2、o、nh或nme；其中每个n可以独立地为0或1；其中y＝o或s；其中a＝芳香族取代基；其中r＝h或吡啶基亚甲基。芳香族取代基可以是1h-吲哚、4-(三氟甲基)苯、2，5-二甲氧基苯、4-氯苯胺、苯胺、5-(三氟甲基)吡啶-2-基、6-(三氟甲基)烟碱、或4-氯苯。10、在一些情况下，lgic配体可以是喹核碱并且可以具有式ii中所示的结构：11、12、其中x3＝o、nh或ch2；其中y＝o或s；其中a＝芳香族取代基；其中r＝h或吡啶基亚甲基。芳香族取代基可以是1h-吲哚、4-(三氟甲基)苯、4-氯苯、2，5-二甲氧基苯、4-(三氟甲基)苯、4-氯苯胺、苯胺、5-(三氟甲基)吡啶-2-基、6-(三氟甲基)烟碱、3-氯-4-氟苯或1h-吲哚。喹核碱可以是pnu-282987、pha-543613、化合物0456、化合物0434、化合物0436、化合物0354、化合物0353、化合物0295、化合物0296、化合物0536、化合物0676或化合物702。13、在一些情况下，lgic配体可以是莨菪烷，并且可以具有式iii中所示的结构：14、15、其中x2＝nh或nme；其中x3＝o、nh或ch2；其中y＝o或s；其中a＝芳香族取代基。芳香族取代基可以是1h-吲哚、7-甲氧基-1h-吲哚、7-甲基-1h-吲哚、5-氯-1h-吲哚或1h-吲唑。莨菪烷可以是托烷司琼、假托烷司琼、去甲托烷司琼、化合物723、化合物725、化合物737或化合物745。16、在某些情况下，lgic配体可以是9-氮杂二环[3.3.1]壬烷，并且可以具有式iv中所示的结构：17、18、其中x1可以是ch，x2可以是nh或nme，x3可以是o、nh或ch；y可以是o或s，并且a可以是芳香族取代基。芳香族取代基可以是4-氯-苯。9-氮杂二环[3.3.1]壬烷可以是化合物0536。19、另一方面，本文件的特征在于对经修饰的配体门控离子通道(lgic)具有增加的效力的配体，其中配体可以是6,7，8,9-四氢-6，10-亚甲基-6h-吡嗪并(2，3-h)苯丙氮卓并具有式v所示的结构：20、21、其中r可以是h或ch3，并且其中a可以是h或芳香族取代基。6，7，8,9-四氢-6，10-亚甲基-6h-吡嗪并(2，3-h)苯丙氮卓可以是伐伦克林、化合物0765或化合物0770。22、另一方面，本文件的特征在于对经修饰的配体门控离子通道(lgic)具有增加的效力的配体，其中配体可以是1,4-二氮杂二环[3.2.2]壬烷，并且可以具有式vi中所示的结构：23、24、其中r可以是h、f或no2。1，4-二氮杂二环[3.2.2]壬烷可以是3-(1,4-二氮杂二环[3.2.2]壬-4-基)二苯并[b，d]噻吩5,5-二氧化物、化合物0773、或化合物0774。25、另一方面，本文件的特征在于治疗哺乳动物中的通道病的方法。方法包括对哺乳动物细胞施用经修饰的lgic或基本上由对哺乳动物细胞施用经修饰的lgic组成，其中外源lgic配体选择性结合经修饰的lgic。经修饰的lgic具有至少一个经修饰的lgic亚基，其包括含有至少一个经修饰的氨基酸的lbd和ipd；并对哺乳动物施用外源配体。通道病可以是巴特综合征(bartter syndrome)、brugada综合征、儿茶酚胺依赖性室性心动过速(catecholaminergic polymorphic ventricular tachycardia，cpvt)、先天性高胰岛素血症(congenital hyperinsulinism)、囊性纤维化(cystic fibrosis)、dravet综合征、发作性共济失调(episodic ataxia)、红斑性肢痛病(erythhromelalgia)、全身型癫痫(generalized epilepsy)(例如伴有热性癫痫发作(febrile seizures))、家族性偏瘫性偏头痛(familial hemiplegic migraine)、纤维肌痛(fibromyalgia)、高钾性周期性麻痹(hyperkalemic periodic paralysis)、低钾性周期性麻痹(hypokalemic periodicparalysis)、兰伯特肌无力综合征(lambert-eaton myasthenic syndrome)、qt延长综合征(1ong qt syndrome)(如罗马诺-沃德综合征(romano-ward syndrome))、短qt综合征(short qt syndrome)、恶性高热(malignant hyperthermia)、粘脂贮积症ⅳ型(mucolipidosis type iv)、重症肌无力(myasthenia gravis)、先天性肌强直(myotoniacongenital)、视神经脊髓炎(neuromyelitis optica)、神经性肌强直(neuromyotonia)、非综合征性耳聋(nonsyndromic deafness)、先天性副肌强直(paramyotonia congenital)、色素性视网膜炎(retinitis pigmentosa)、蒂莫西综合征(timothy syndrome)、耳鸣(tinnitus)、癫痫发作(seizure)、三叉神经痛(trigeminal neuralgia)和多发性硬化(multiple sclerosis)。26、另一方面，本文件的特征在于调控穿过哺乳动物细胞膜的离子转运的方法。该方法包括对细胞施用经修饰的lgic或基本上由对细胞施用经修饰的lgic组成，其中外源lgic配体选择性结合经修饰的lgic。经修饰的lgic具有至少一个经修饰的lgic亚基，所述经修饰的lgic亚基包括含有至少一个经修饰的氨基酸的lbd和ipd；并对所述哺乳动物施用外源配体。调控可包括激活或抑制离子转运。细胞可以是神经元、神经胶质细胞、肌细胞、干细胞、内分泌细胞或免疫细胞。对细胞施用经修饰的lgic可以是体内施用或离体施用。对细胞施用经修饰的lgic可以包括施用编码经修饰的lgic的核酸。27、另一方面，本文件的特征在于调控哺乳动物中的细胞兴奋性的方法。所述方法包括对哺乳动物细胞施用经修饰的lgic或基本上由对哺乳动物细胞施用经修饰的lgic组成，其中外源lgic配体选择性结合经修饰的lgic。经修饰的lgic具有至少一个经修饰的lgic亚基，所述经修饰的lgic亚基包括含有至少一个经修饰的氨基酸的lbd和ipd；并对哺乳动物施用外源配体。调控可以包括增加细胞的兴奋性或降低细胞的兴奋性。细胞可以是可兴奋的细胞。细胞可以是神经元、神经胶质细胞、肌细胞、干细胞、内分泌细胞或免疫细胞。对细胞施用经修饰的lgic可以是体内施用或离体施用。对细胞施用经修饰的lgic可以包括施用编码经修饰的lgic的核酸。28、另一方面，本文件的特征在于调控哺乳动物中的细胞活性的方法。该方法包括对细胞施用经修饰的lgic或基本上由对细胞施用经修饰的lgic组成，其中外源lgic配体选择性结合修饰的lgic。经修饰的lgic具有至少一个经修饰的lgic亚基，所述经修饰的lgic亚基包括含有至少一个经修饰的氨基酸的lbd和ipd；并对哺乳动物施用外源配体。调控可以包括增加细胞活性或降低细胞活性。活性可以是离子转运、被动转运、激发、抑制或胞吐作用。细胞可以是神经元、神经胶质细胞、肌细胞、干细胞、内分泌细胞或免疫细胞。对细胞施用经修饰的lgic可以是体内施用或离体施用。对细胞施用经修饰的lgic可以包括施用编码经修饰的lgic的核酸(例如，通过病毒载体，例如腺相关病毒、单纯疱疹病毒或慢病毒)。29、另一方面，本文件的特征在于用于鉴定选择性结合经修饰的lgic的配体的方法。方法包括以下各项或基本上由以下各项组成：对本文所述的经修饰的lgic提供一种或多种候选配体，并检测候选配体和经修饰的lgic之间的结合，从而鉴定选择性结合经修饰的lgic的配体。经修饰的lgic可以是同聚体的经修饰的lgic。30、在另一方面，本文件的特征在于用于检测经修饰的lgic的方法。方法包括以下各项或基本上由以下各项组成：提供一种或多种本文所述的经修饰的lgic亚基，提供选择性结合经修饰的lgic的试剂，并检测经修饰的lgic与选择性结合经修饰的lgic的试剂之间的结合，从而检测经修饰的lgic。选择性结合经修饰的lgic的试剂包括抗体、蛋白质(例如，银环蛇毒素)或小分子(例如正电子发射断层摄影术(pet)配体)。选择性结合经修饰的lgic的试剂可以包括可检测的标记物(例如，荧光标记物、放射性标记物或正电子发射标记物)。31、除非另外定义，本文使用的所有技术和科学术语具有与本公开所属领域的普通技术人员通常理解的含义相同的含义。本文描述了用于本公开的方法和材料；也可以使用本领域已知的其它合适方法和材料。材料、方法和实例仅是说明性的而非限制性的。本文提及的所有出版物、专利申请、专利、序列、数据库条目和其他参考文献都通过引用整体并入。在冲突的情况下，以本说明书(包括定义)为准。32、在附图和以下描述中阐述了本发明的一个或多个实施方案的细节。根据说明书和附图以及权利要求书，本发明的其他特征、目的和优点将显而易见。当前第1页12当前第1页12
技术特征：1.核酸，其编码经修饰的α7-烟碱乙酰胆碱受体(α7-nachr)配体结合域(lbd)，其中所述经修饰的α7-nachr lbd由以下组成：seq id no:2的具有(a)l131g氨基酸取代；(b)l131g氨基酸取代和q139l氨基酸取代；(c)l131g氨基酸取代和y217f氨基酸取代；或(d)l131g氨基酸取代、q139l氨基酸取代和y217f氨基酸取代的氨基酸。
2.核酸，其编码至少一个经修饰的配体门控离子通道(lgic)亚基，所述至少一个经修饰的lgic亚基包含权利要求1的经修饰的α7-nachr lbd和离子孔域(ipd)。
3.核酸，其编码经修饰的配体门控离子通道(lgic)，所述经修饰的配体门控离子通道包含权利要求2的至少一个经修饰的lgic亚基。
4.权利要求2或3的核酸，其中所述离子孔域(ipd)是血清素3受体(5ht3)ipd。
5.权利要求2或3的核酸，其中所述离子孔域(ipd)是γ-氨基丁酸(gaba)受体ipd。
6.权利要求2或3的核酸，其中所述离子孔域(ipd)是α7-烟碱乙酰胆碱受体(α7-nachr)ipd。
7.权利要求1-6中任一项的核酸，其中所述经修饰的α7-nachr lbd具有l131g氨基酸取代。
8.权利要求1-6中任一项的核酸，其中所述经修饰的α7-nachr lbd具有l131g氨基酸取代和q139l氨基酸取代。
9.权利要求1-6中任一项的核酸，其中所述经修饰的α7-nachr lbd具有l131g氨基酸取代和y217f氨基酸取代。
10.权利要求1-6中任一项的核酸，其中所述经修饰的α7-nachr lbd具有l131g氨基酸取代、q139l氨基酸取代和y217f氨基酸取代。
11.权利要求1-10中任一项的核酸，其中所述经修饰的α7-nachr lbd进一步包含选自下组的一个或多个氨基酸残基处的氨基酸取代：如seq id no:2中编号的残基175、210、216和219。
12.权利要求11的核酸，其中所述氨基酸取代位于
13.权利要求3-12中任一项的核酸，其中外源配体选择性结合并且激活所述经修饰的lgic，并且相对于缺乏所述经修饰的lgic亚基的lgic，所述经修饰的lgic具有降低的用内源性乙酰胆碱(ach)的激活效力。
14.权利要求13的核酸，其中所述经修饰的lgic对ach具有>20μm的ec50。
15.权利要求13的核酸，其中所述降低的用ach的激活效力相对于缺乏所述经修饰的lgic亚基的lgic至少降低3倍。
16.权利要求13-15中任一项的核酸，其中所述外源配体是选自下组的合成的外源lgic配体：喹核碱、莨菪烷、9-氮杂二环[3.3.1]壬烷、6,7,8,9-四氢-6,10-亚甲基-6h-吡嗪并(2,3-h)苯丙氮卓和1,4-二氮杂二环[3.2.2]壬烷。
17.权利要求16的核酸，其中所述合成的外源lgic配体是：
18.哺乳动物细胞，其包含权利要求1-17中任一项的核酸。
19.病毒载体，其包含权利要求1-17中任一项的核酸。
20.权利要求19的病毒载体，其中所述病毒载体是腺相关病毒载体。
21.权利要求3-17中任一项的核酸或权利要求19或20的病毒载体在制备用于治疗哺乳动物中的通道病的药物中的用途，其中该药物用于方法中，所述方法包括：
22.权利要求21的用途，其中所述通道病选自下组：巴特综合征、brugada综合征、儿茶酚胺依赖性室性心动过速(cpvt)、先天性高胰岛素血症、囊性纤维化、dravet综合征、发作性共济失调、红斑性肢痛病、全身型癫痫(例如伴有热性癫痫发作)、家族性偏瘫性偏头痛、纤维肌痛、高钾性周期性麻痹、低钾性周期性麻痹、兰伯特肌无力综合征、长qt综合征(如罗马诺-沃德综合征)、短qt综合征、恶性高热、粘脂贮积症iv型、重症肌无力、先天性肌强直、视神经脊髓炎、神经性肌强直、非综合征性耳聋、先天性副肌强直、色素性视网膜炎、蒂莫西综合征(timothy syndrome)、耳鸣、癫痫发作(seizure)、三叉神经痛和多发性硬化。
23.权利要求3-17中任一项的核酸或权利要求19或20的病毒载体在制备用于调节穿过哺乳动物细胞膜的离子转运的药物中的用途，其中所述药物用于方法中，所述方法包括：
24.权利要求23的用途，其中所述调节包括激活离子转运。
25.权利要求23的用途，其中所述调节包括抑制离子转运。
26.权利要求23的用途，其中所述细胞选自下组：神经元、神经胶质细胞、肌细胞、干细胞、内分泌细胞和免疫细胞。
27.权利要求23的用途，其中对所述细胞施用所述经修饰的lgic包括体内施用。
28.权利要求3-17中任一项的核酸或权利要求19或20的病毒载体在制备用于调节哺乳动物中细胞的兴奋性的药物中的用途，其中所述药物用于方法中，所述方法包括：
29.权利要求28的用途，其中所述调节包括增加所述细胞的兴奋性。
30.权利要求28的用途，其中所述调节包括降低所述细胞的兴奋性。
31.权利要求28的用途，其中所述细胞是可兴奋细胞。
32.权利要求28的用途，其中所述细胞选自下组：神经元、神经胶质细胞、肌细胞、干细胞、内分泌细胞和免疫细胞。
33.权利要求28的用途，其中对所述细胞施用所述经修饰的lgic包括体内施用。
34.权利要求3-17中任一项的核酸或权利要求19或20的病毒载体在制备用于调节哺乳动物中细胞的活性的药物中的用途，其中所述药物用于方法中，所述方法包括：
35.权利要求34的用途，其中所述调节包括增加所述细胞的活性。
36.权利要求34的用途，其中所述调节包括降低所述细胞的活性。
37.权利要求34的用途，其中所述活性选自下组：离子转运、被动转运、激发、抑制和胞吐作用。
38.权利要求34的用途，其中所述细胞选自下组：神经元、神经胶质细胞、肌细胞、干细胞、内分泌细胞和免疫细胞。
39.权利要求34的用途，其中对来自所述哺乳动物的细胞施用所述经修饰的lgic包括体内施用。
40.权利要求34的用途，其中对来自所述哺乳动物的细胞施用经修饰的lgic包括离体施用。
41.权利要求21、23、28和34中任一项的用途，其中所述外源lgic配体是合成的外源lgic配体。
42.权利要求41的用途，其中所述合成的外源lgic配体是：
技术总结本文件涉及用于控制配体门控离子通道(LGIC)活性的材料和方法。例如，提供了包含至少一个LGIC亚基的经修饰的LGIC，所述LGIC亚基具有经修饰的配体结合域(LBD)和/或经修饰的离子孔域(IPD)。还提供了可以结合并激活经修饰的LGIC的外源LGIC配体，以及调控跨哺乳动物细胞膜的离子转运的方法、调控哺乳动物中的细胞兴奋性的方法和治疗具有通道病的哺乳动物的方法。
技术研发人员：S·斯特恩森,P·李,C·马格努斯
受保护的技术使用者：霍华休斯医学研究院
技术研发日：技术公布日：2024/12/17
