本发明属于中药材提取,具体涉及一种通过酶/超声协同辅助天然低共熔溶剂制备黄芪多糖提取物的方法。
背景技术:
1、黄芪astragalus mongholicus为豆科黄芪属蒙古黄芪或膜荚黄芪的根,是一味传统中草药,在《中国药典》2020版中有描述,味甘,性微温,归脾、肺经,具有升阳举陷,健脾补中,益卫固表,脱毒生肌之功效。黄芪多糖(aps)是黄芪的主要活性成分之一,近年来研究表明其具有抗氧化、抗病毒和免疫调节等重要生物活性。传统的aps提取方法一般为水提取法或者脱脂后水提,提取率较低,且能源要求较高,需要反复提取,反复醇沉,具有提取时间长、能耗高等缺点。还有微生物发酵提取法、微波辅助提取法、负压空化萃取法、加压热水萃取法等,微生物发酵提取法需要解决优良菌种的问题,微波及负压空化法队工艺设备要求高不适合大规模生产。
2、目前,回流提取、乙醇沉淀等方法仍是药典和工业应用最常用的提取手段。但利用这些方法目前常存在aps提取率偏低、提取时间长、提取物易变质、制备过程工艺较繁琐等问题。
技术实现思路
1、本发明的目的是为了解决上述技术问题,提供一种绿色、高效的酶辅助天然低共熔溶剂超声促提黄芪多糖的方法,该方法可高效提取黄芪多糖,其中氯化胆碱-乳酸(chcl-lac)提取效率最佳,对黄芪多糖的提取率达143mg/g脱脂黄芪粉末,较水为溶剂时高88.2%,显著优于传统的加热水提法。本方法融合天然低共熔溶剂(natural deepeutectic solvent,nades)法、酶促提取法、超声辅助提取法为“酶辅助-天然低共熔溶剂-超声促提法”对中药材黄芪进行多糖提取,提取率高,方法所需时间短、能耗低,是一种黄芪多糖的高效率、绿色便捷的提取方法,并有望作为一种新型中药及其他天然药物的提取方法。
2、为实现上述目的,本发明采用的技术方案是:
3、本发明提供一种黄芪多糖提取物的制备方法,所述方法为:将脱脂后的黄芪粉末加入含纤维素酶的低共熔溶剂水溶液中,于50-75℃下超声提取15-60min,离心,取上清醇沉后即得黄芪多糖;所述低共熔溶剂水溶液中的低共熔溶剂包括氯化胆碱与甘油(chcl-gly)、氯化胆碱与乳酸(chcl-lac)、氯化胆碱与尿素(chcl-ur)的一种。
4、进一步,所述低共熔溶剂包括:氯化胆碱(chcl)与甘油(gly)以物质的量之比1:2,混合后在80℃加热1h制成的des-1(chcl-gly);氯化胆碱(chcl)与乳酸(lac)以物质的量之比1:1,混合后在80℃加热1h制成的des-2(chcl-lac);氯化胆碱(chcl)与尿素(ur)以物质的量之比1:2,混合后在80℃加热1h制成的des-3(chcl-ur)。
5、进一步,所述低共熔溶剂水溶液中低共熔溶剂体积浓度为5-25%,更优选10%。
6、进一步,所述黄芪粉末重量与低共熔溶剂水溶液体积用量(料液比)为1:15-50g/ml,更优选1:30g/ml。
7、进一步,所述纤维素酶量与所用黄芪粉末占比为0.5-2u/mg,更优选1u/mg。
8、进一步,超声功率为300w。
9、进一步,提取条件优选为:在75℃、300w下超声提取30min。在该条件下,能够以更低的能耗得到更高的提取率。
10、与现有技术相比,本发明有益效果主要体现在:本发明提供一种高效、绿色的利用酶辅助天然低共熔溶剂超声促提黄芪多糖的方法,该方法可高效提取黄芪多糖,是一种适用于中药及其他天然药物的新型高效提取方法。
1.一种黄芪多糖提取物的制备方法,其特征在于,所述方法为:将脱脂后的黄芪粉末加入含纤维素酶的低共熔溶剂水溶液中,于50-75℃下超声提取15-60min,离心,取上清醇沉后即得黄芪多糖;所述低共熔溶剂水溶液中的低共熔溶剂包括氯化胆碱与甘油、氯化胆碱与乳酸、氯化胆碱与尿素的一种。
2.根据权利要求1所述一种黄芪多糖提取物的制备方法,其特征在于,所述低共熔溶剂包括:氯化胆碱与甘油以物质的量之比1:2,混合后在80℃加热1h制成的des-1;氯化胆碱与乳酸以物质的量之比1:1,混合后在80℃加热1h制成的des-2;氯化胆碱与尿素以物质的量之比1:2,混合后在80℃加热1h制成的des-3。
3.根据权利要求2所述一种黄芪多糖提取物的制备方法,其特征在于,所述低共熔溶剂为氯化胆碱与乳酸以物质的量之比1:1,混合后在80℃加热1h制成。
4.根据权利要求1所述一种黄芪多糖提取物的制备方法,其特征在于,所述低共熔溶剂水溶液中低共熔溶剂体积浓度为5-25%。
5.根据权利要求4所述一种黄芪多糖提取物的制备方法,其特征在于,所述低共熔溶剂水溶液中低共熔溶剂体积浓度为10%。
6.根据权利要求1所述一种黄芪多糖提取物的制备方法,其特征在于,所述黄芪粉末重量与低共熔溶剂水溶液体积用量为1:15-50g/ml。
7.根据权利要求6所述一种黄芪多糖提取物的制备方法,其特征在于,所述黄芪粉末重量与低共熔溶剂水溶液体积用量为1:30g/ml。
8.根据权利要求1所述一种黄芪多糖提取物的制备方法,其特征在于,所述纤维素酶量与黄芪粉末占比为0.5-2u/mg。
9.根据权利要求8所述一种黄芪多糖提取物的制备方法,其特征在于,所述纤维素酶量与黄芪粉末占比为1u/mg。
10.根据权利要求1所述一种黄芪多糖提取物的制备方法,其特征在于,提取条件为在75℃、300w下超声提取30min。
