本发明涉及一株链霉菌d-6，具体涉及一株链霉菌d-6、其微生态制剂及其制备方法。
背景技术：
1、水产养殖业在全球范围内发展迅速，其已经成为为人类提供食物最可持续发展的项目之一，然而水产养殖业现面临着难以承受的鱼类健康问题，鱼类高密度饲养和水质恶化为病原体繁殖和侵染创造了理想的环境，使鱼类发病率大幅度上升，鱼类高死亡率和发病率对水产养殖业造成了巨大的经济损失，严重地阻碍了水产养殖业高效、经济和可持续的发展。
2、随着对鱼类病害防控研究的深入，越来越多创新性手段相继出现，流行的手段主要涉及抗生素、疫苗及中草药。然而抗生素虽然展现出了对病原体防御的极大优势，但治疗过程中抗生素导致的肠道微生物组的菌群失调为肠道中现有病原微生物创造条件，这对于水产养殖可持续性发展极为不利。鱼类疫苗在水产养殖业中的开发和使用依然存在一些局限性，如减毒活疫苗在使用过程中需要确保它们不会恢复到原来的毒力。目前大多数中草药的作用机制尚不清楚，且其生长阶段及生长条件对其中的活性成分产生较大的影响，使得中草药在水产养殖业的应用难以全面展开。
3、微生态制剂是目前水产养殖业中最有前景的一种病害防控产品，相对于抗生素等其他制剂来说，其可以对宿主产生有益效果并改善环境参数，在水产养殖中加以运用可以增强鱼体生长及免疫性能，以对抗鱼类病害，提高鱼类存活率，具有无毒无害、绿色环保等特点。
4、但是，将链霉菌作为益生菌应用于水产养殖的报道较为罕见。
技术实现思路
1、本发明要解决的技术问题是，克服现有技术存在的上述缺陷，提供一株链霉菌d-6、其微生态制剂及其制备方法；所述链霉菌及其微生态制剂对多种常见鱼类致病菌有较好的拮抗作用，可以用于抵抗多种致病菌感染。
2、本发明解决其技术问题所采用的技术方案如下：一株链霉菌d-6，于2024年6月13日保藏于中国典型培养物保藏中心(简称“cctcc”)，保藏编号为cctcc no：m 20241201；分类命名为：链霉菌d-6，拉丁学名streptomyces sp.d-6。
3、本发明之链霉菌d-6筛选自湖南省沅陵县借母溪的土壤。本发明之链霉菌d-6的16s rrna基因序列如表seq id no.1所示。
4、本发明链霉菌d-6的应用，作为鱼类致病菌的拮抗菌。
5、本发明链霉菌d-6，可制成微生态制剂使用。
6、本发明链霉菌d-6的微生态制剂，由菌种保藏号为cctcc no：m 20241201的链霉菌d-6发酵制成。
7、优选地，所述微生态制剂为液体菌剂或固体菌剂。
8、优选地，所述微生态制剂用于水产养殖。
9、优选地，所述水产养殖的动物为淡水鱼；更优选为鲫鱼、草鱼或鲤鱼。
10、本发明之链霉菌d-6的微生态制剂的制备方法，包括以下步骤：
11、(1)接种活化：将链霉菌d-6接种于斜面高氏一号培养基上，挑取单克隆菌落到am6培养基中进行发酵培养，收集发酵种子液；
12、(2)第一次扩大培养：将步骤(1)所得的发酵种子液接种到有发酵培养基的发酵罐中进行第一次扩大培养，得到扩大培养的种子液i；
13、(3)第二次扩大培养：将步骤(2)所得扩大培养种子液i接种到装有发酵培养基的发酵罐中，进行第二次扩大培养，得到扩大培养液ii；
14、(4)浓缩收集：收集步骤(3)所得的扩大培养液ii，浓缩，得到液体菌剂；固体菌剂通过将所述液体菌剂或扩大培养液ii喷雾干燥所得。
15、优选地，步骤(2)中，发酵种子液接种到发酵罐中的接种量是发酵培养基体积的1.0～1.5％。
16、优选地，步骤(2)中，所述扩大培养的发酵培养基的溶剂为水，配方为：细菌学蛋白胨4～6g/l，酵母浸膏4～6g/l，碳酸钙4～6g/l，葡萄糖8～12g/l，可溶性淀粉15～25g/l。
17、优选地，步骤(2)中，所述第一次扩大培养的溶氧量40～50％。
18、优选地，步骤(2)中，所述第一次扩大培养的温度28～30℃。
19、优选地，步骤(2)中，所述第一次扩大培养的时间为48～72h。
20、优选地，步骤(2)中，培养过程中使用发酵消泡剂避免起泡。
21、优选地，步骤(3)中，所述扩大培养种子液i的接种量是发酵培养基体积的10～15％。
22、优选地，步骤(3)中，所述扩大培养的发酵培养基的溶剂为水，配方为：细菌学蛋白胨4～6g/l，酵母浸膏4～6g/l，碳酸钙4～6g/l，葡萄糖8～12g/l，可溶性淀粉15～25g/l。
23、优选地，步骤(3)中，所述第二次扩大培养的溶氧量40～50％。
24、优选地，步骤(3)中，所述第二次扩大培养的温度28～30℃。
25、优选地，步骤(3)中，所述第二次扩大培养的时间为108～144h。
26、优选地，步骤(3)中，培养过程中使用发酵消泡剂避免起泡。
27、本发明有益效果：
28、(1)本发明链霉菌d-6，对类志贺邻单胞菌、维氏气单胞菌、异常嗜糖气单胞菌、厦门希瓦氏菌等多种鱼类病原菌具有较好的抑菌效果。
29、(2)链霉菌d-6发酵液性质稳定，腹腔注射该菌株可在鱼体内抑制维氏气单胞菌的生长。
30、(3)链霉菌d-6可作为饲料添加剂饲喂鱼类，饲喂后能够改善鱼体生长性能，增强鱼体对病原菌的抵抗力。
31、(4)将链霉菌d-6制备成微生态制剂的方法简单，生产成本较低，同时还能有效降低抗生素滥用导致的药物残留等危害，具有良好的应用前景。
32、本发明之链霉菌d-6的16s rrna基因序列如表seq id no.1所示。
33、seq id no.1：
34、
35、
36、微生物保藏情况说明
37、本发明之链霉菌d-6，于2024年6月13日保藏于中国典型培养物保藏中心(简称cctcc，地址：中国武汉武汉大学)，菌种保藏号为cctcc no：m 20241201；分类命名为：链霉菌d-6；拉丁学名：streptomyces sp.d-6。
1.一株链霉菌d-6，其特征在于，于2024年6月13日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为cctcc no：m 20241201；分类命名为：链霉菌d-6，拉丁学名streptomyces sp.d-6。
2.根据权利要求1所述的链霉菌d-6，其特征在于，链霉菌d-6的16s rrna基因序列如表seq id no.1所示。
3.根据权利要求1或2所述的链霉菌d-6的微生态制剂，其特征在于，由菌种保藏号为cctcc no：m 20241201的链霉菌d-6发酵制成。
4.根据权利要求3所述的链霉菌d-6的微生态制剂，其特征在于，所述微生态制剂为液体菌剂或固体菌剂；和/或所述微生态制剂用于水产养殖。
5.根据权利要求3或4所述的链霉菌d-6的微生态制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
6.根据权利要求5所述的链霉菌d-6的微生态制剂的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，发酵种子液接种到发酵罐中的接种量是发酵培养基体积的1.0～1.5％；和/或，步骤(2)中，所述扩大培养的发酵培养基的溶剂为水，配方为：细菌学蛋白胨4～6g/l，酵母浸膏4～6g/l，碳酸钙4～6g/l，葡萄糖8～12g/l，可溶性淀粉15～25g/l。
7.根据权利要求5或6所述的链霉菌d-6的微生态制剂的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述第一次扩大培养的溶氧量40～50％；和/或，步骤(2)中，所述第一次扩大培养的温度28～30℃；和/或，步骤(2)中，所述第一次扩大培养的时间为48～72h；和/或，步骤(2)中，培养过程中使用发酵消泡剂避免起泡。
8.根据权利要求5或6所述的链霉菌d-6的微生态制剂的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述扩大培养种子液i的接种量是发酵培养基体积的10～15％；和/或，步骤(3)中，所述扩大培养的发酵培养基的溶剂为水，配方为：细菌学蛋白胨4～6g/l，酵母浸膏4～6g/l，碳酸钙4～6g/l，葡萄糖8～12g/l，可溶性淀粉15～25g/l。
9.根据权利要求5或6所述的链霉菌d-6的微生态制剂的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述第二次扩大培养的溶氧量40～50％；和/或，步骤(3)中，所述第二次扩大培养的温度28～30℃；和/或，步骤(3)中，所述第二次扩大培养的时间为108～144h；和/或，步骤(3)中，培养过程中使用发酵消泡剂避免起泡。
10.如权利要求1或2所述的链霉菌d-6在水产养殖方面的应用。
