本发明涉及生猪饲养，特别涉及用于母猪早期妊娠诊断的蛋白标志物及其应用。
背景技术：
1、随着集约化养猪业的发展，母猪早期妊娠诊断对提高母猪繁殖率和养猪场经济效益的作用越来越明显。母猪配种后，对母猪是否妊娠作出及时而准确的判断，可以对空怀的母猪及时进行采取复配措施，减少其空怀期和缩短胎次间隔，有利于提高母猪繁殖力，也有利于减少因无效饲养增加的饲料成本；对于已经妊娠的母猪可以进行及时保胎，提供周到的孕期管理。因此，妊娠的早期准确诊断可以降低母猪非生产天数、提高母猪使用效率、提高母猪年生产力、降低饲养成本等，对于经济型猪场的有效管理非常重要。
2、传统的母猪早期妊娠诊断方法主要有发情周期判断法、激素注射诊断法、超声诊断法等；发情周期判断法通过观察母猪配种后，经过一个发情周期(18-25天)是否出现发情现象，如不再发情，并且食欲渐增，性情温驯，尾巴自然下垂，驱逐时夹着尾巴走路、阴户缩成一条线等现象，则初步断定已经妊娠。激素注射诊断法通过对配种16-18天的母猪肌内注射己烯雌酚等雌激素，如果母猪空怀，则在2-3天内表现发情；如注射后2-3天无发情表现，说明已经妊娠。超声诊断法通过超声影像图谱来判断，用此法来进行母猪早期妊娠诊断一般在妊娠第28天以上才有较高的检出率。前述检测方法存在天数较长、症状诊断不明确、易错失母猪最佳配种时期等问题，母猪繁殖效率无法得到有效提升。
3、随着分子生物学的快速发展，基于生物标志物的分子诊断技术以其高灵敏度、高特异性和高效性，成为了许多疾病的早期诊断和治疗的重要保障。生物标志物是指可以明确标识系统、器官等结构或功能的改变的生化指标，如dna、rna、蛋白质等生物分子都可以作为生物标志物用于研究。其中，蛋白质作为基因表达的最终产物，直接反映了机体生命的复杂和多变性，蛋白标志物在疾病的早期预测、诊断和治疗中发挥着不可替代的作用；蛋白标志物的水平变化，通常反映了机体生理或病理状态的改变。利用分子诊断技术在早期快速、敏感、特异地检测妊娠母猪中的特定蛋白标志物，有利于实现母猪妊娠的早期诊断。
4、然而，目前关于母猪早期妊娠蛋白的研究较少，仍然缺乏准确和可靠的蛋白类生物标志物用于母猪早期妊娠诊断，因此，开发具有母猪早期诊断价值的蛋白生物标志物，对于实现生猪饲养降本增效具有重要意义。
技术实现思路
1、针对现有技术中的上述技术问题，本发明首次发现def6及muc5ac蛋白可以单独或者联合使用作为快速检测母猪是否妊娠的蛋白标志物，通过检测本发明的蛋白标志物的表达水平，可在配种早期快速、准确地判断母猪妊娠状态，为母猪早期妊娠诊断提供了新的方向和途径，对于缩短母猪胎次间隔、降低母猪非生产天数，提高养猪企业的经济效益等具有重要作用。
2、本发明第一方面提供了蛋白标志物在制备母猪早期妊娠诊断试剂或试剂盒中的应用，所述蛋白标志物为def6蛋白和/或muc5ac蛋白。
3、本发明第二方面提供了检测蛋白标志物表达水平的试剂在制备母猪早期妊娠诊断试剂或试剂盒中的应用，所述蛋白标志物为def6蛋白和/或muc5ac蛋白。
4、进一步地，上述所述的def6蛋白的氨基酸序列如seq id no.1所示，上述所述的muc5ac蛋白的氨基酸序列如seq id no.2所示。
5、进一步地，上述所述的蛋白标志物为所述母猪阴道分泌物中蛋白。
6、进一步地，上述所述的早期妊娠诊断的时间为所述母猪配种后第15天。
7、进一步地，上述所述的母猪为长白猪、约克郡猪或其杂交后代。
8、进一步地，上述所述的检测所述蛋白标志物表达水平的试剂为特异性结合所述蛋白标志物的抗体。
9、进一步地，上述所述的试剂或试剂盒为酶联免疫吸附试剂或试剂盒。
10、本发明第三方面提供了一种用于非诊断目的的母猪早期妊娠诊断方法，包括以下步骤：
11、采集配种后的待检测母猪阴道分泌物，检测所述阴道分泌物中def6蛋白和/或muc5ac蛋白的表达水平，根据所述def6蛋白和/或所述muc5ac蛋白的表达水平判断所述待检测母猪是否妊娠；
12、当检测到所述def6蛋白和/或所述muc5ac蛋白相比于未妊娠母猪高表达，判定所述待检测母猪处于妊娠状态，当检测到所述def6蛋白和/或所述muc5ac蛋白相比于未妊娠母猪低表达，判定所述待检测母猪处于非妊娠状态。
13、进一步地，所述阴道分泌物的采集时间为所述待检测母猪配种后的第15天。
14、进一步地，采集的所述阴道分泌物的处理方法包括：将所述阴道分泌物加入到2mlpbs溶液中，静置30min后涡旋2min，之后1000g离心15min，取上清用于检测所述def6蛋白和/或所述muc5ac蛋白的表达水平。
15、本发明相比于现有技术，具有如下的有益效果：
16、本发明提供的蛋白标志物—def6蛋白和/或muc5ac蛋白的表达水平与母猪是否妊娠密切相关，在妊娠组和非妊娠组母猪阴道分泌物中def6蛋白和muc5ac蛋白表达水平差异显著且在妊娠组中显著高表达，适于作为母猪早期妊娠诊断生物标志物，其敏感度与特异性较好，误报率极低，用于早期妊娠诊断具有较高的准确性。通过检测本发明的蛋白标志物的表达水平，可实现在配种早期快速、准确地判断母猪妊娠状态，为母猪早期妊娠诊断提供了新的方向和途径，且有利于实现大规模配种群体的早期诊断，对于缩短母猪胎次间隔、降低母猪非生产天数，提高养猪企业的经济效益等具有重要作用。
1.蛋白标志物在制备母猪早期妊娠诊断试剂或试剂盒中的应用，其特征在于，所述蛋白标志物为def6蛋白和/或muc5ac蛋白。
2.根据权利要求1所述的蛋白标志物在制备母猪早期妊娠诊断试剂或试剂盒中的应用，其特征在于，所述def6蛋白的氨基酸序列如seq id no.1所示，所述muc5ac蛋白的氨基酸序列如seq id no.2所示。
3.根据权利要求1所述的蛋白标志物在制备母猪早期妊娠诊断试剂或试剂盒中的应用，其特征在于，所述蛋白标志物为所述母猪阴道分泌物中蛋白。
4.根据权利要求1所述的蛋白标志物在制备母猪早期妊娠诊断试剂或试剂盒中的应用，其特征在于，所述早期妊娠诊断的时间为所述母猪配种后第15天。
5.根据权利要求1所述的蛋白标志物在制备母猪早期妊娠诊断试剂或试剂盒中的应用，其特征在于，所述母猪为长白猪、约克郡猪或其杂交后代。
6.根据权利要求1所述的蛋白标志物在制备母猪早期妊娠诊断试剂或试剂盒中的应用，其特征在于，所述试剂或试剂盒为酶联免疫吸附试剂或试剂盒。
7.检测蛋白标志物表达水平的试剂在制备母猪早期妊娠诊断试剂或试剂盒中的应用，其特征在于，所述蛋白标志物为def6蛋白和/或muc5ac蛋白。
8.根据权利要求7所述的检测蛋白标志物表达水平的试剂在制备母猪早期妊娠诊断试剂或试剂盒中的应用，其特征在于，所述def6蛋白的氨基酸序列如seq id no.1所示，所述muc5ac蛋白的氨基酸序列如seq id no.2所示。
9.根据权利要求8所述的检测蛋白标志物表达水平的试剂在制备母猪早期妊娠诊断试剂或试剂盒中的应用，其特征在于，检测所述蛋白标志物表达水平的试剂为特异性结合所述蛋白标志物的抗体。
10.一种用于非诊断目的的母猪早期妊娠诊断方法，其特征在于，包括以下步骤：
