本发明涉及化妆品，具体涉及一种基于乳酸菌发酵茶的组合物及其在制备护肤美容化妆品中的应用。
背景技术：
1、以乳酸菌为主的益生菌及其发酵产物在护肤美容方面具有广泛应用。研究表明乳酸菌发酵产物具有显著抗氧化活性，从而发挥护肤功效(唐柳映,曹晓蕊,伍文怡,等.益生元-乳酸菌发酵活性成分对护肤功效的影响.医学美学美容,2024,33(5):29-32.)。茶也因其护肤美容功效而在化妆品产业中广泛应用(杨环毓,钱忠英,傅秀花,等.红茶、绿茶提取物的协同护肤功效.精细化工,2020,37(2):426-432；刘欠,刘雅璇,肖娟,等.茶叶美容护肤作用机制及应用研究进展.中国医药导报,2018,15(33):40-42.)。近年来还发现，细胞分泌到细胞外发挥细胞间信息交换的囊泡暨外泌体具有显著的促进皮肤再生更新功效(吴曙霞,邵佳青,杨健,等.国际外泌体化妆品管理现状与趋势.中国医药生物技术,2024,19(2):104-107.)。外泌体粒径范围30～150nm，含有用于细胞间通讯的脂质、蛋白质和核酸等生物活性成分。通过对外泌体在疤痕改善、色素沉着矫正、皮肤年轻化和脱发恢复中的研究显示，外泌体发挥其抗氧化和促进细胞再生特性，起到减缓皮肤衰老作用，从而提升皮肤紧致度和光泽。干细胞外泌体能够加速伤口愈合、减轻炎症反应，特别是在敏感皮肤和受损皮肤护理中，促进皮肤屏障修复与再生。外泌体对于促进毛囊修复、毛发再生也有显著效果。
2、将乳酸菌发酵产物、茶叶中活性成分以及动物、植物和微生物来源的外泌体应用于化妆品领域已取得诸多成果。例如专利文献cn114657107a公开以植物乳植杆菌(保藏号cctcc no:m2021683)裂解液为唯一功效成分制备的净痘精华霜，经人体试验证实能有效改善轻中度痤疮，减小痤疮面积和皮肤油脂含量，降低经皮水分流水以及增加皮肤水分含量，使皮肤颜色趋于正常，毛孔变细，平衡皮肤酸碱度。专利文献cn117815156a公开了一种对皮肤具有良好修护和紧致作用的绿茶多酚修护霜。专利文献cn115025034a公开了一种间充质干细胞外泌体组合物，具有协同增强细胞修复、美白和抗衰老等方面的功效。专利文献cn114159373a公开了一种石斛来源外泌体样囊泡在护肤化妆品中的应用，其可降低β-半乳糖苷酶活性、抑制弹性蛋白降解、消减皮肤皱纹、增强皮肤弹性，还能够抑制黑色素在细胞中的合成，达到美白效果。专利文献cn116948921a公开了一种植物乳杆菌外泌体的应用，以该菌制备的外泌体能够促进表皮细胞增殖，从而能够增加皮肤弹性、减少皱纹，达到延缓皮肤老化的作用，并能够加速皮肤创面修复愈合。
3、现有技术获取外泌体的方法以单纯细胞培养为主，目前尚未见以茶作为乳酸菌发酵底物，从发酵产物中分离外泌体，并与发酵产物中活性物质组合应用于护肤美容的研究报道。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供一种具有护肤美容功效的组合物，起到消减皮肤皱纹、提高皮肤弹性、美白的作用，将其应用的化妆品开发。
2、为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
3、本发明提供了一种基于乳酸菌发酵茶的组合物，所述乳酸菌发酵茶为以保藏号为cgmcc 1.60149的植物乳杆菌lactobacillus plantarum zju2303-rh17为发酵菌株，新鲜茶叶为发酵底物，发酵培养后得到的发酵液；从发酵液中分离得到外泌体作为组分ⅰ，发酵液除去外泌体后经真空干燥和超微粉碎得到组分ⅱ；所述组合物包括组分ⅰ和组分ⅱ，两者的质量比为1:10～20。
4、上述组分ⅱ中含有多酚、乳酸菌发酵产物及乳酸菌与茶叶细胞成分等活性物质。通过组分ⅰ和组分ⅱ的合理配比，充分发挥外泌体与其它活性物质之间的协同效应，显著改善皮肤皱纹、黑色素沉积等问题。
5、本发明采用植物乳杆菌作为发酵菌种，植物乳杆菌是一种分布和用途广泛的乳酸菌，具有良好的发酵特性和充分的安全性。
6、本发明采用的植物乳杆菌lactobacillus plantarum zju2303-rh17为公众能够得到的生物材料，公开保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(cgmcc)，保藏号为cgmcc 1.60149。
7、本发明以安吉白茶鲜叶作为乳酸菌发酵底物，具有充分的安全性和丰富的活性物质来源。安吉白茶是安吉当地特有茶种，茶叶富含以茶多酚为代表的丰富天然产物。安吉白茶种植于山区，因山区昼夜温差大病虫害不易滋生，可不施用农药。安吉白茶鲜叶可采用但不限于夏秋季鲜叶。相较于春季的明前茶和雨前茶，夏秋季茶叶中的活性物质因为积累时间长而含量更丰富。
8、作为优选，新鲜茶叶粉碎后加水稀释8-12倍，再加入mrs液体培养基制得发酵培养基，mrs液体培养基与茶叶的质量比为1:2。mrs液体培养基是适用于乳酸菌发酵的培养基，为乳酸菌的生长扩繁提供营养物质。
9、进一步优选，所述乳酸菌发酵茶的制备方法包括以下步骤：
10、(1)茶与水混合物制备：将安吉白茶鲜叶粉碎后，加水混合，以重量份计，每100份水中加入茶叶10份；
11、(2)乳酸菌接种发酵：将植物乳杆菌lactobacillus plantarum zju2303-rh17加入到步骤(1)的茶与水混合物中，接种密度为1～3×107cfu/ml，以重量份计，每100份水中再加入5份mrs液体培养基，25～30℃发酵48～72小时，得到发酵液。
12、所述外泌体的制备方法包括：将发酵液于4℃以5000g离心10min，对分离菌体后得到的上清液先用0.45μm滤膜过滤，再于4℃以15000g离心20min，所得沉淀即为所述外泌体。
13、本发明制备的外泌体呈圆球状，双层膜结构，粒径60～140nm，符合外泌体形态特征。研究表明，本发明提供的外泌体具有促进皮肤细胞胶原蛋白合成和抑制黑色素生成的功效。本发明的外泌体是以乳酸菌发酵茶叶制备的，兼具了外泌体、乳酸菌发酵产物、茶叶中活性物质等多方面优势。
14、上述发酵液中除了外泌体，还有发酵产物、乳酸菌以及发酵后的茶叶，富含活性物质，本发明将除去外泌体后的发酵液真空干燥浓缩，再利用超微粉碎技术进行粉碎，所得到的组分ⅱ也具备促进皮肤细胞胶原蛋白合成和抑制黑色素生成的功效，将其与组分ⅰ复配，产生协同增效作用。
15、作为优选，所述超微粉碎的条件为：采用低温超微破壁粉碎机，-10℃下粉碎10min后4℃存放。
16、作为优选，所述组合物中组分ⅰ和组分ⅱ的质量比为1:15。
17、本发明还提供了所述的基于乳酸菌发酵茶的组合物在制备护肤美容的化妆品中的应用。
18、进一步的，所述护肤美容包括但不限于除皱、美白。
19、本发明提供的组合物能够促进皮肤细胞胶原蛋白生成，起到消减皮肤皱纹、提高皮肤弹性作用。
20、本发明提供的组合物能够抑制皮肤细胞黑色素生成，起到皮肤美白作用。
21、本发明还提供了一种具有促进胶原蛋白合成和/或抑制黑色素生成功效的化妆品，包括有效剂量的所述的基于乳酸菌发酵茶的组合物和化妆品辅料基质。
22、所述有效剂量是指组合物的分量足够对皮肤问题的改善起效。所述辅料基质是指能够递送本发明有效剂量活性物质，不干扰活性物质的生物活性并且对宿主或受试者无毒副作用的任何制剂或载体介质。
23、本发明具备的有益效果：
24、本发明在植物乳杆菌cgmcc 1.60149为发酵菌株的基础上，以新鲜茶叶为发酵底物，具有充分的安全性和丰富的活性物质来源，所获得的乳酸菌发酵茶的发酵组合物包括外泌体、多酚、乳酸菌发酵产物及乳酸菌与茶叶细胞成分，能够充分发挥外泌体与其它活性物质之间的协同效应，更好地发挥护肤美容功效。
1.一种基于乳酸菌发酵茶的组合物，其特征在于，所述乳酸菌发酵茶为以保藏号为cgmcc 1.60149的植物乳杆菌lactobacillus plantarum zju2303-rh17为发酵菌株，新鲜茶叶为发酵底物，发酵培养后得到的发酵液；从发酵液中分离得到外泌体作为组分ⅰ，发酵液除去外泌体后经真空干燥和超微粉碎得到组分ⅱ；所述组合物包括组分ⅰ和组分ⅱ，两者的质量比为1:10～20。
2.如权利要求1所述的基于乳酸菌发酵茶的组合物，其特征在于，新鲜茶叶粉碎后加水稀释8-12倍，再加入mrs液体培养基制得发酵培养基，mrs液体培养基与茶叶的质量比为1:2。
3.如权利要求1所述的基于乳酸菌发酵茶的组合物，其特征在于，所述乳酸菌发酵茶的制备方法包括以下步骤：
4.如权利要求1或3所述的基于乳酸菌发酵茶的组合物，其特征在于，所述外泌体的制备方法包括：将发酵液于4℃以5000g离心10min，对分离菌体后得到的上清液先用0.45μm滤膜过滤，再于4℃以15000g离心20min，所得沉淀即为所述外泌体。
5.如权利要求1所述的基于乳酸菌发酵茶的组合物，其特征在于，所述超微粉碎的条件为：采用低温超微破壁粉碎机，-10℃下粉碎10min后4℃存放。
6.如权利要求1所述的基于乳酸菌发酵茶的组合物，其特征在于，所述组合物中组分ⅰ和组分ⅱ的质量比为1:15。
7.如权利要求1-5任一项所述的基于乳酸菌发酵茶的组合物在制备护肤美容的化妆品中的应用。
8.如权利要求7所述的应用，其特征在于，所述护肤美容包括除皱、美白。
9.一种具有促进胶原蛋白合成和/或抑制黑色素生成功效的化妆品，其特征在于，包括有效剂量的如权利要求1-5任一项所述的基于乳酸菌发酵茶的组合物和化妆品辅料基质。
