本发明涉及生物医学领域，特别涉及一种粉尘螨变应原atp酶钠/钾转运β2亚基蛋白及其应用。
背景技术：
1、过敏性疾病又称变态反应疾病，有过敏性鼻炎、过敏性哮喘、异位性皮炎等，都属于临床常见病。过敏性疾病由吸入性、食入性、接触性和药物性等多种变应原引起。世界变态反应组织估算全球过敏性疾病患病率是10-40％。其中约包括3亿的支气管哮喘患者、4亿的过敏性鼻炎患者、2亿的食物性过敏患者和1.5亿药物过敏患者。过敏性哮喘是哮喘疾病中的一个重要表型，约占成人哮喘患者的50％以上，在儿童哮喘患者中更高达80％以上。
2、尘螨是最主要的引起过敏性疾病的变应原来源物种，其虫体及排泄物等均被鉴定为室内主要的吸入性变应原。对过敏性疾病患者血清进行变应原特异性ige免疫分析结果显示，超过70％血清样本呈尘螨变应原阳性反应。尘螨虫体和粪便的蛋白组成复杂，目前研究发现尘螨至少有40种变应原成分，其中尘螨变应原第一组分和第二组分是尘螨主要变应原，尽管大多数过敏性疾病患者血清特异性的对尘螨主要变应原成分呈阳性反应，但不同的过敏性疾病患者有可能只会对部分次要变应原或者稀有的变应原成分发生致敏反应。部分变应原还存在协同致敏效应，致敏机制复杂多样，临床上也一直采用的尘螨粗提取浸出液作为有效的脱敏治疗的首选方案。因此，发现和鉴定更多的尘螨变应原组分，可以给尘螨过敏疾病的精准治疗提供理论依据。
技术实现思路
1、有鉴于此，本发明的目的在于提供一种粉尘螨变应原atp酶钠/钾转运β2亚基蛋白及其应用，该新发现的粉尘螨变应原为粉尘螨atp酶钠/钾转运β2亚基蛋白的同源物，可用于制备诊断、治疗、预防过敏性疾病的试剂，特别是用于制备诊断、治疗、预防尘螨引发的过敏性疾病的试剂。
2、本发明的技术方案如下：
3、本发明的第一方面，提供一种粉尘螨变应原atp酶钠/钾转运β2亚基蛋白，所述粉尘螨变应原atp酶钠/钾转运β2亚基蛋白的氨基酸序列如seq id no.1所示。
4、本发明的第二方面，提供一种含有粉尘螨变应原atp酶钠/钾转运β2亚基蛋白的共表达蛋白，所述共表达蛋白的氨基酸序列如seq id no.2所示。
5、本发明的第三方面，提供一种核酸，所述核酸编码如第一方面所述的粉尘螨变应原atp酶钠/钾转运β2亚基蛋白。
6、本发明的第四方面，提供一种重组载体，所述重组载体含有编码如第一方面所述的粉尘螨变应原atp酶钠/钾转运β2亚基蛋白的基因表达盒。
7、本发明的第五方面，提供一种宿主细胞，所述宿主细胞含有如第四方面所述的重组载体。
8、本发明的第六方面，提供一种组合物，所述组合物含有如第一方面所述的粉尘螨变应原atp酶钠/钾转运β2亚基蛋白。
9、可选地，所述组合物还包括药学上可接受的载体。
10、本发明的第七方面，提供一种如第一方面所述的粉尘螨变应原atp酶钠/钾转运β2亚基蛋白的制备方法，包括：
11、提取粉尘螨总rna，反转录得cdna；
12、设计引物，通过pcr扩增获得粉尘螨变应原atp酶钠/钾转运β2亚基蛋白的编码基因，所述粉尘螨变应原atp酶钠/钾转运β2亚基蛋白的编码基因的核苷酸序列如seq idno.3所示；
13、将所述粉尘螨变应原atp酶钠/钾转运β2亚基蛋白的编码基因插入到表达载体中，得到重组质粒；
14、将所述重组质粒转至宿主细胞中进行蛋白质的表达，纯化，获得粉尘螨变应原atp酶钠/钾转运β2亚基蛋白。
15、可选地，所述引物包括如seq id no.4所示的上游引物和如seq id no.5所示的下游引物。
16、本发明的第八方面，提供一种如第一方面所述的粉尘螨变应原atp酶钠/钾转运β2亚基蛋白、如第二方面所述的共表达蛋白、如第三方面所述的核酸、如第四方面所述的重组载体、如第五方面所述的宿主细胞、如第六方面所述的组合物或如第七方面所述的制备方法制备得到的粉尘螨变应原atp酶钠/钾转运β2亚基蛋白在制备诊断、治疗、预防过敏性疾病的试剂中的应用。
17、有益效果：本发明提供一种粉尘螨变应原atp酶钠/钾转运β2亚基蛋白及其应用，该粉尘螨变应原atp酶钠/钾转运β2亚基蛋白是新发现的粉尘螨变应原组分，属于粉尘螨atp酶钠/钾转运β2亚基蛋白的同源物。本发明通过基因克隆、蛋白质表达、分离纯化制备得到重组粉尘螨变应原atp酶钠/钾转运β2亚基蛋白和硫氧还蛋白标签蛋白的共表达蛋白，通过ige-酶联免疫反应、ige免疫印迹等实验手段鉴定共表达蛋白中的重组粉尘螨变应原atp酶钠/钾转运β2亚基蛋白具有一定的过敏原性，可作为粉尘螨变应原，用于制备尘螨引发的过敏性疾病的诊断、治疗、预防的试剂，特别是用于制备粉尘螨atp酶钠/钾转运β2亚基蛋白引发的过敏性疾病的诊断、治疗、预防的试剂。
1.一种粉尘螨变应原atp酶钠/钾转运β2亚基蛋白，其特征在于，所述粉尘螨变应原atp酶钠/钾转运β2亚基蛋白的氨基酸序列如seq id no.1所示。
2.一种含有粉尘螨变应原atp酶钠/钾转运β2亚基蛋白的共表达蛋白，其特征在于，所述共表达蛋白的氨基酸序列如seq id no.2所示。
3.一种核酸，其特征在于，所述核酸编码如权利要求1所述的粉尘螨变应原atp酶钠/钾转运β2亚基蛋白。
4.一种重组载体，其特征在于，所述重组载体含有编码如权利要求1所述的粉尘螨变应原atp酶钠/钾转运β2亚基蛋白的基因表达盒。
5.一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞含有如权利要求4所述的重组载体。
6.一种组合物，其特征在于，所述组合物含有如权利要求1所述的粉尘螨变应原atp酶钠/钾转运β2亚基蛋白。
7.根据权利要求6所述的组合物，其特征在于，所述组合物还包括药学上可接受的载体。
8.一种如权利要求1所述的粉尘螨变应原atp酶钠/钾转运β2亚基蛋白的制备方法，其特征在于，包括：
9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述引物包括如seq id no.4所示的上游引物和如seq id no.5所示的下游引物。
10.一种如权利要求1所述的粉尘螨变应原atp酶钠/钾转运β2亚基蛋白、如权利要求2所述的共表达蛋白、如权利要求3所述的核酸、如权利要求4所述的重组载体、如权利要求5所述的宿主细胞、如权利要求6～7任一项所述的组合物或如权利要求8～9任一项所述的制备方法制备得到的粉尘螨变应原atp酶钠/钾转运β2亚基蛋白在制备诊断、治疗、预防过敏性疾病的试剂中的应用。
