本发明涉及蜂蜜检测,具体地说,涉及一种鉴别无刺蜂蜂蜜的方法与应用。
背景技术:
1、无刺蜂(stingless bees)属于膜翅目(hymenoptera)、蜜蜂科(apidae)、麦蜂族(meliponini)昆虫,由于尾部蛰针退化,被名为无刺蜂,主要生活在热带和亚热带地区。无刺蜂体型小,飞行能力较低,是小型植物的主要授粉者,它可采集巢穴周围开花的汁液、植物或昆虫分泌物,并储存于用蜂胶和蜂蜡的混合物制成的球型罐中,即为无刺蜂蜂蜜。无刺蜂蜂蜜的口感酸甜,水分含量较高,主要由糖类组成。研究发现无刺蜂蜂蜜中含有丰富的营养成分,如多酚类化合物等,具有显著的药理活性和药用价值,例如抗氧化、消炎、抑菌、促进伤口愈合、抗糖尿病、治疗眼部疾病、调节机体代谢、调节肠道菌群等,因此越来越受消费者的喜爱。
2、甘露醇(mannitol)是一种糖醇,与山梨糖醇互为同分异构体,其分子式和分子量分别为c6h14o6和182.17g/mol。甘露醇的工业生产困难且昂贵,但可以从一些天然来源中提取和获得,如葡萄糖代谢、蔬菜、水果、藻类、菌类、坚果和种子等。目前,甘露醇在食品、化工和医疗工业中的用途,受到人们的广泛关注。甘露醇与蔗糖和葡萄糖相比对血糖水平的影响较小,非常适合作为节食人群和糖尿病患者的食品成分。由于甘露醇具有非还原性,不会引起美拉德反应,被用于烘焙行业中来保持产品的颜色外观。甘露醇作为一种高效的脱水剂和利尿剂,有助于接受血管和心脏手术的患者降低颅内压力的升高,保护患者手术时期的肾功能。作为六元醇,甘露醇的羟基容易发生取代、酯化和缩合反应,从而生成一系列具有生物活性的衍生物或其中间体。甘露醇具有优秀的生物学功能,然而目前还未见其可作为某类蜂蜜特征标志物的报道。
技术实现思路
1、本发明的目的之一在于提供一种鉴别无刺蜂蜂蜜的新方法。
2、本发明提供了一种鉴别无刺蜂蜂蜜的方法,当待测蜂蜜中含有甘露醇时,则判定所述待测蜂蜜为无刺蜂蜂蜜。
3、本发明研究发现,仅在无刺蜂蜂蜜中可检测到甘露醇,而在其他蜂蜜中未检测到,由此,本发明提出了一种新的鉴别无刺蜂蜂蜜的方法。
4、甘露醇是一种糖醇,结构式为:
5、。
6、甘露醇标准样品易于获得,适合作为特征识别物。
7、本发明的方法适用于不同品种的无刺蜂蜂蜜的鉴别,可将不同品种的无刺蜂蜂蜜(包括并不限于多种无刺蜂如黄纹无刺蜂 lepidotrigona flavibasis、顶无刺蜂 lepidotrigona terminata、黑胸无刺蜂 tetragonula pagdeni、戈氏无刺蜂 tetragonulag ressitti、宾氏无刺蜂 tetrigona binghami、卡式无刺蜂 tetragonula carbonaria、虹无刺蜂 tetragonula hockingsi、墨脱鳞无刺蜂 lepidotrigona arcifera产生的蜂蜜)与其他蜂蜜区分开来。
8、本发明的方法中,通过hplc-rid色谱法对所述待测蜂蜜中是否存在甘露醇进行检测。
9、本发明通过hplc-rid建立了蜂蜜中甘露醇的检测方法,此方法可以实现甘露醇的快速分析,从而有利于无刺蜂蜂蜜的鉴别。
10、具体地,本发明采用高效液相检测器配示差检测器对待测蜂蜜样品进行检测,若所得色谱图中在对应时间内含有甘露醇的特征峰时,则判定蜂蜜中含有甘露醇,待测蜂蜜样品为无刺蜂蜂蜜;反之,若不含有所述特征峰时,则判定蜂蜜中不含有甘露醇,待测蜂蜜样品不是无刺蜂蜂蜜。
11、本发明的方法中,以hplc-rid色谱法进行检测时,色谱柱为hi-plex pb;流动相为水。
12、本发明的方法中,以hplc-rid色谱法进行检测时,柱温为50±5℃;压力为0.5-0.7kpa。
13、本发明的方法中,以hplc-rid色谱法进行检测时,示差检测器为rid-10a,检测温度为50±5℃。
14、本发明的方法中,以hplc-rid色谱法进行检测时,进样量为20~25μl;流速为0.4~0.5ml/min;单梯度洗脱时间为55~60min。
15、优选,本发明的方法中,以hplc-rid色谱法进行检测时,色谱柱为hi-plex pb;流动相为水;柱温为50℃;压力为0.6kpa;示差检测器为rid-10a,检测温度为50℃;进样量为20μl;流速为0.4ml/min;单梯度洗脱时间为60min。
16、本发明的方法中,在以hplc-rid色谱法进行检测前,还包括对所述待测蜂蜜进行预处理的步骤;所述预处理的方法为:将所述待测蜂蜜与水混合后取上清液过尼龙膜。
17、本发明的检测方法不需要对待测蜂蜜进行复杂的前处理,仅进行简单的稀释和过滤即可实现后续的检测。优选将待测蜂蜜的水溶液过0.22μm尼龙滤膜即可。
18、本发明还提供上述方法在判别无刺蜂蜂蜜真伪中的应用。
19、本发明的应用中,当检测到待测蜂蜜中含有甘露醇时,则判定所述待测蜂蜜为真的无刺蜂蜂蜜;当检测到待测蜂蜜中不含有甘露醇时,则判定所述待测蜂蜜不为无刺蜂蜂蜜。
20、本发明的有益效果至少在于:
21、本发明确定了甘露醇可以作为鉴别无刺蜂蜂蜜的特征识别物,为无刺蜂蜂蜜真实性及品质评价体系提供了新的判定方法。
1.一种鉴别无刺蜂蜂蜜的方法,其特征在于,当待测蜂蜜中含有甘露醇时,则判定所述待测蜂蜜为无刺蜂蜂蜜。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,通过hplc-rid色谱法对所述待测蜂蜜中是否存在甘露醇进行检测。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,以hplc-rid色谱法进行检测时,色谱柱为hi-plex pb;流动相为水。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,以hplc-rid色谱法进行检测时,柱温为50±5℃;压力为0.5-0.7kpa。
5.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,以hplc-rid色谱法进行检测时,示差检测器为rid-10a,检测温度为50±5℃。
6.根据权利要求2-5任一项所述的方法,其特征在于,以hplc-rid色谱法进行检测时,进样量为20~25μl;流速为0.4~0.5ml/min;单梯度洗脱时间为55~60min。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,以hplc-rid色谱法进行检测时,色谱柱为hi-plex pb;流动相为水;柱温为50℃;压力为0.6kpa;示差检测器为rid-10a,检测温度为50℃;进样量为20μl;流速为0.4ml/min;单梯度洗脱时间为60min。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,在以hplc-rid色谱法进行检测前,还包括对所述待测蜂蜜进行预处理的步骤;
9.权利要求1-8任一项所述的方法在判别无刺蜂蜂蜜真伪中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,当检测到待测蜂蜜中含有甘露醇时,则判定所述待测蜂蜜为真的无刺蜂蜂蜜;当检测到待测蜂蜜中不含有甘露醇时,则判定所述待测蜂蜜不为无刺蜂蜂蜜。
