本发明属于微生物制剂领域，具体涉及一种改善初烤烟叶品质的复合微生物制剂及其使用方法。
背景技术：
1、初烤烟叶品质受多种因素影响，传统方法是通过观察、品尝等感官评测进行考烟叶品质的考察，除了感官评测之外，人们还通过烤烟中的化学成分情况来分析烤烟的品质，例如将初烤烟叶的主要化学成分与其部分感官评吸指标的关系进行分析。
2、现有用于改善初烤烟叶品质的技术研究日益增多，总体而言，可分为三类，一类是添加化学外源物质，例如防霉剂、润滑剂、吸附剂和香精香料等；第二类是酶制剂，例如淀粉酶、蛋白质酶、纤维素酶等；第三类是发酵技术，前两类改善初烤烟叶品质的技术通常存在改善的指标相对单一，难以全面提升烤烟品质的弊端，例如淀粉酶仅能降低烤烟中的淀粉含量。而第三类发酵技术由于发酵过程能产生多种代谢产物，还能特异性的对烤烟中的相关成分进行消耗，通常能改变烤烟中多种物质含量或者物质间的比例，因而采用发酵技术以改善烤烟品质，日益受到人们的关注。
3、但利用发酵技术改善烤烟品质也存在相应的弊端，最明显的是处理时间过长，例如在《中国食用菌》上发表的“几株食用菌对初烤烟叶品质的影响”中用三种食用菌对初烤烟叶进行发酵处理，其发酵周期长达50天；专利名称为“一种烟叶的发酵生产方法，专利公开号cn101322580b”中采用的发酵技术进行一次发酵也需要3天，而且需要反复处理，处理时间长达180天以上。
4、因此，提供一种既可以全面改善初烤烟叶品质，又具有处理时间短优点的技术，是本领域所亟需的。
技术实现思路
1、针对现有技术的缺陷，本发明的目的在于提供一种改善初烤烟叶品质的复合微生物制剂及其使用方法，可以克服现有技术的不足。
2、为了实现上述技术目的，本发明提供了如下技术方案：
3、改善初烤烟叶品质的复合微生物制剂是，所述复合微生物制剂由苏云金芽孢杆菌(b.thuringiensis)hncs-93的培养液、胶质芽孢杆菌(b.mucilaginosus)nk-102的培养液和坚强芽孢杆菌b.firmus sab-1的培养液按体积比为3:3:3～5混合构成。
4、前述的改善初烤烟叶品质的复合微生物制剂是，所述培养液为对所述苏云金芽孢杆菌(b.thuringiensis)hncs-93、胶质芽孢杆菌(b.mucilaginosus)nk-102和坚强芽孢杆菌(b.firmus)sab-1分别进行液体培养后进行离心，弃去菌体沉淀，收集上清所得。
5、前述的改善初烤烟叶品质的复合微生物制剂是，所述苏云金芽孢杆菌(b.thuringiensis)hncs-93的培养液、胶质芽孢杆菌(b.mucilaginosus)nk-102的培养液和坚强芽孢杆菌(b.firmus)sab-1的培养液的混合时的体积比为1:1:1。
6、前述的改善初烤烟叶品质的复合微生物制剂是，所述苏云金芽孢杆菌(b.thuringiensis)hncs-93的培养液的制备方法为，将苏云金芽孢杆菌(b.thuringiensis)hncs-93在lb固体培养基划线培养，之后挑单菌落接种于lb液体培养基中，在30℃下摇床培养72小时，得到培养物，对培养物进行离心，将菌体沉淀分离出去，取培养物上清。
7、前述的改善初烤烟叶品质的复合微生物制剂是，所述胶质芽孢杆菌(b.mucilaginosus)nk-102的培养液的制备方法为，将胶质芽孢杆菌(b.mucilaginosus)nk-102在lb固体培养基划线培养后，挑单菌落接种于lb液体培养基中，在35℃下摇床培养48小时，得到培养物，对培养物进行离心，将菌体沉淀分离出去，取培养物上清。
8、前述的改善初烤烟叶品质的复合微生物制剂是，所述坚强芽孢杆菌(b.firmus)sab-1的培养液的制备方法为：将坚强芽孢杆菌(b.firmus)sab-1在lb固体培养基划线培养后，挑单菌落接种于lb液体培养基中，在30℃下摇床培养24小时，得到培养物，对培养物进行离心，将菌体沉淀分离出去，取培养物上清。
9、前述的改善初烤烟叶品质的复合微生物制剂的使用方法是，在烟叶完成采摘并放入烤房烘烤至变黄期，然后用喷雾器喷施复合微生物制剂喷施烤房内的烟叶，然后继续烘烤，所述复合微生物制剂的喷施量为烤房内烤烟重量的1-3％。
10、前述的改善初烤烟叶品质的复合微生物制剂的使用方法是，在烟叶烘烤至变黄期末期，用喷雾器喷施复合微生物制剂，喷施量为烤烟重量的1-3％，喷施时注意叶面湿润但不形成水滴，喷施完毕后，在烤房干球温度42℃，湿球温度39℃下进行稳温烘烤1-2小时，然后进入定色烘烤阶段。
11、前述的改善初烤烟叶品质的复合微生物制剂的使用方法是，所述烟叶为上部烟叶。
12、与现有技术比较，本发明在研究之初，发现将上述三种菌混合培养时，出现了明显的生长抑制作用，不宜用于对烤烟的发酵。但当将三种菌的发酵物上清混合并进行喷施后，不但可以显著的提高施木克值，还能有效的提高总美拉德反应物和总游离氨基酸的含量，并且还可以大幅度的降低淀粉、果胶和木质素的含量，从而其对于烤烟的品质能产生全面的提升，具有使用方便、处理时间短和品质提升全面的优点。
13、同时通过进一步试验实现发现，单独使用苏云金芽孢杆菌(b.thuringiensis)的培养液、胶质芽孢杆菌(b.mucilaginosus)nk-102的培养液和坚强芽孢杆菌(b.firmus)sab-1，无论是将其发酵烟叶还是将其培养物上清喷施烟叶，对于烤烟品质的影响均不显著。具体的实验方案、实验数据和分析，详见实验例部分。
1.一种改善初烤烟叶品质的复合微生物制剂，其特征在于：所述复合微生物制剂由苏云金芽孢杆菌b. thuringiensis hncs-93的培养液、胶质芽孢杆菌b. mucilaginosus nk-102的培养液和坚强芽孢杆菌b. firmus sab-1的培养液按体积比为3:3:3～5混合构成。
2.根据权利要求1所述的改善初烤烟叶品质的复合微生物制剂，其特征在于：所述培养液为对所述苏云金芽孢杆菌b. thuringiensis hncs-93、胶质芽孢杆菌b. mucilaginosus nk-102和坚强芽孢杆菌b. firmus sab-1分别进行液体培养后进行离心，弃去菌体沉淀，收集上清所得。
3.根据权利要求1或2所述的改善初烤烟叶品质的复合微生物制剂，其特征在于：所述苏云金芽孢杆菌b. thuringiensis hncs-93的培养液、胶质芽孢杆菌b. mucilaginosus nk-102的培养液和坚强芽孢杆菌b. firmus sab-1的培养液的混合时的体积比为1:1:1。
4.根据权利要求3所述的改善初烤烟叶品质的复合微生物制剂，其特征在于：所述苏云金芽孢杆菌b. thuringiensis hncs-93的培养液的制备方法为，将苏云金芽孢杆菌b. thuringiensis hncs-93在lb固体培养基划线培养，之后挑单菌落接种于lb液体培养基中，在30℃下摇床培养72小时，得到培养物，对培养物进行离心，将菌体沉淀分离出去，取培养物上清。
5.根据权利要求3所述的改善初烤烟叶品质的复合微生物制剂，其特征在于：所述胶质芽孢杆菌b. mucilaginosus nk-102的培养液的制备方法为，将胶质芽孢杆菌b. mucilaginosus nk-102在lb固体培养基划线培养后，挑单菌落接种于lb液体培养基中，在35℃下摇床培养48小时，得到培养物，对培养物进行离心，将菌体沉淀分离出去，取培养物上清。
6.根据权利要求3所述的改善初烤烟叶品质的复合微生物制剂，其特征在于：所述坚强芽孢杆菌b. firmus sab-1的培养液的制备方法为：将坚强芽孢杆菌b. firmus sab-1在lb固体培养基划线培养后，挑单菌落接种于lb液体培养基中，在30℃下摇床培养24小时，得到培养物，对培养物进行离心，将菌体沉淀分离出去，取培养物上清。
7.如权利要求1～6任一项所述的改善初烤烟叶品质的复合微生物制剂的使用方法，其特征在于：在烟叶完成采摘并放入烤房烘烤至变黄期，然后用喷雾器喷施复合微生物制剂喷施烤房内的烟叶，然后继续烘烤，所述复合微生物制剂的喷施量为烤房内烤烟重量的1-3%。
8.如权利要求7所述的改善初烤烟叶品质的复合微生物制剂的使用方法，其特征在于：在烟叶烘烤至变黄期末期，用喷雾器喷施复合微生物制剂，喷施量为烤烟重量的1-3%，喷施时注意叶面湿润但不形成水滴，喷施完毕后，在烤房干球温度42℃，湿球温度39℃下进行稳温烘烤1-2小时，然后进入定色烘烤阶段。
9.根据权利要求8所述的改善初烤烟叶品质的复合微生物制剂的使用方法，其特征在于：所述烟叶为上部烟叶。
