本发明属于药物制剂，涉及一种胆固醇单胍偶联物的制备及其应用。
背景技术：
1、阳离子脂质分子通常包含一个或多个带正电荷的头基，一个疏水的尾部，以及一个连接头基和尾部的疏水链的链接部分。阳离子脂质的所拥有的正电荷头基，能够与带负电荷的生物大分子产生静电作用，这有助于包裹和压缩生物大分子，以形成脂质复合体，从而提高其细胞摄取率。另外，阳离子脂质可用于制备阳离子脂质体或者脂质纳米粒，包载除了生物大分子以外的活性成分。所制成的制剂与普通脂质制剂相比，在提高肿瘤组织靶向性以及细胞摄取率方面具有优势。
2、但是，阳离子型脂质通常具有较强的溶血性，静脉给药后，容易破坏血液循环系统中的红细胞，使之破裂，从而导致溶血。另外，阳离子脂质本身对细胞也具有一定的毒性，这些性质限制了阳离子型脂质在制剂开发以及临床的应用。有必要寻找低毒、低溶血性的阳离子脂质。
技术实现思路
1、为了克服现有技术的一些不足，本发明的目的之一在于提供一种胆固醇单胍偶联物的应用，所述胆固醇单胍偶联物用于制备微粒给药系统。该胆固醇单胍偶联物具有溶血性低的特点。
2、本发明的目的之二在于提供一种胆固醇单胍偶联物。
3、本发明的目的之三在于提供上述胆固醇单胍偶联物的合成制备方法。
4、本发明的目的之一采用如下技术方案实现：
5、一种胆固醇单胍偶联物的应用，所述胆固醇单胍偶联物用于制备微粒给药系统。
6、优选地，微粒给药系统为微粒、纳米粒、脂质体、乳剂、聚合物胶束、凝胶或上述类型的混合物。
7、进一步地，所述胆固醇单胍偶联物通过自组装包载药物制备成微粒给药系统的应用，或所述胆固醇单胍偶联物通过与其他载体辅料共用包载药物制备成微粒给药系统的应用。
8、进一步地，所述胆固醇单胍偶联物通过自组装包载药物制备成微粒给药系统为微粒、纳米粒、凝胶中的一种；所述胆固醇单胍偶联物通过与其他载体辅料共用包载药物制备成微粒给药系统为微粒、微球、纳米粒、脂质体、乳剂、聚合物胶束中的一种。
9、进一步地，所述胆固醇单胍偶联物通过自组装包载药物制备成微粒给药系统的过程如下：
10、当待包载药物为脂溶性药物时，其制备过程为：将胆固醇单胍偶联物与待包载药物溶于有机溶剂中混合得到有机混合液，将水系溶液与有机混合液混合得到悬浊液；然后将悬浊液分散，除去有机溶剂，得到胆固醇单胍偶联物包载脂溶性药物的微粒给药系统的水系溶液；
11、当待包载药物为水溶性药物时，其制备过程可分为两种，其一为：将胆固醇单胍偶联物与有机溶剂混合得到有机混合液，将水系溶液与有机混合液混合得到悬浊液；然后将悬浊液分散，除去有机溶剂；将水溶性药物或其水溶液加入到上述悬浊液中孵育，即得胆固醇单胍偶联物包载水溶性药物的微粒给药系统的水系溶液；
12、其二为：将胆固醇单胍偶联物与有机溶剂混合得到有机混合液，将水溶性药物或其水溶液、水系溶液与有机混合液混合得到悬浊液；然后将悬浊液分散，除去有机溶剂；即得胆固醇单胍偶联物包载水溶性药物的微粒给药系统的水系溶液；
13、所述水系溶液为水或溶解水性辅料的水溶液。
14、进一步地，所述胆固醇单胍偶联物与包载药物的质量比为10000～0.1:1。
15、优选地，上述水系溶液为水或溶解有水溶性辅料的水溶液，所述水溶性辅料为稳定剂、表面活性剂、ph调节剂、渗透压调节剂或抗氧剂等。
16、优选地，所述表面活性剂或稳定剂为pva、peg、泊洛沙姆188、泊洛沙姆407、透明质酸或吐温80。常见的ph调节剂、渗透压调节剂或抗氧剂均可以用于该制剂。
17、偶联物的浓度影响制剂的最终形态，在低浓度时，制剂为流动性良好的纳米粒或微粒；在较高浓度时，制剂在先形成纳米粒或微粒后，后期在室温下会形成凝胶。一般偶联物的浓度在40mg/ml以下，制剂流动性良好。该自组装纳米粒或微粒或后期形成的凝胶，均具有载药功能。因此，脂溶性药物可与偶联物共溶于有机溶剂中，再进行后期的制备。水溶性药物如带负电的水溶性药物则可以溶解于适量水性溶液中，再与制备好的纳米粒共孵育而载药。
18、进一步地，所述胆固醇单胍偶联物与其他载体辅料共用包载药物制备成微粒给药系统的过程如下：
19、当待包载药物为脂溶性药物时，其制备过程为：将胆固醇单胍偶联物、其他载体辅料与待包载药物溶于有机溶剂中得到有机混合液，或者将胆固醇单胍偶联物、待包载药物分散于其他载体辅料中得到有机混合液；将水系溶液与有机混合液混合得到悬浊液；然后将悬浊液分散，除去有机溶剂，得到胆固醇单胍偶联物与载体辅料共用包载药物的微粒给药系统；
20、与其它载体合用时，可以根据载体的性质，灵活采用相应的制备方法，例如，当合用载体辅料为固体脂质时，可以将脂质加热熔融以后，再加入药物和胆固醇单胍偶联物混匀；当合用辅料为液体脂质，如制备乳剂时，可以将药物和胆固醇单胍偶联物溶解于液体脂质中。因此制备方法中的有机溶剂并非不可或缺。
21、当待包载药物为水溶性药物时，其制备过程可分为两种，其一为：将胆固醇单胍偶联物、其他载体辅料与有机溶剂混合得到有机混合液，或者将胆固醇单胍偶联物分散于其他载体辅料中得到有机混合液；将水系溶液与有机混合液混合得到悬浊液；然后将悬浊液分散，除去有机溶剂；将水溶性药物或其水溶液加入到上述悬浊液中孵育，即得胆固醇单胍偶联物与载体辅料共用包载水溶性药物的微粒给药系统的水系溶液；
22、其二为：将胆固醇单胍偶联物、其他载体辅料与有机溶剂混合得到有机混合液，或者将胆固醇单胍偶联物分散于其他载体辅料中得到有机混合液；将水溶性药物或其水溶液、水系溶液与有机混合液混合得到悬浊液；然后将悬浊液分散，除去有机溶剂；即得胆固醇单胍偶联物与载体辅料共用包载水溶性药物的微粒给药系统的水系溶液；
23、所述水系溶液为水或溶解水性辅料的水溶液。
24、进一步地，所述胆固醇单胍偶联物与载体辅料的质量总和与药物的质量比为10000～0.1:1；所述胆固醇单胍偶联物与载体辅料的质量比为1:0.001～1000。
25、含有胆固醇单胍偶联物的制剂，可以吸附带负电的水溶性药物，因此对该类药物包封率和载药量高。同时该类制剂也可以利用其它剂型或载体的优势，包载不同性质的水溶性药物。例如，如果制备成脂质体，则可以利用ph梯度法，包载适宜的药物，通常为弱酸或弱碱型药物，如盐酸阿霉素。因此本发明保护水溶性药物不局限于带负电的水溶性药物。
26、进一步地，所述其他载体辅料为磷脂、胆固醇、脂肪酸单甘油脂、脂肪酸二甘油酯、脂肪酸三甘油酯、脂肪酸、聚乳酸、聚乳酸-羟基乙酸共聚物、聚己内酯、甲氧基聚乙二醇聚乳酸羟基乙酸共聚物、甲氧基聚乙二醇聚已内酯或甲氧基聚乙二醇聚丙交酯，以及上述载体材料与小分子功能基团合成的产物中的一种或几种的混合物。
27、优选地，所述有机溶剂选自二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃、乙酸乙酯、甲醇、乙醇、丙酮、dmso中的一种或几种。
28、很多药物都可以被该胆固醇单胍偶联物包载，如厚朴酚、和厚朴酚、紫杉醇、姜黄素、葫芦素、sn-38、多西他赛、喜树碱、5-氟尿嘧啶、阿霉素、靛玉红、ir-780碘化物、5-氨基乙酰丙酸、醋酸棉酚、花氰荧光素、替尼泊苷、甲氨喋呤、冬凌草甲素、水飞蓟宾等。本发明实施例以抗肿瘤药物为主，但是并不局限于此。因为本发明所指的胆固醇单胍偶联物，主要作为一种无毒的辅料，因此其使用范围并不受疾病的限制。
29、本发明的目的之二采用如下技术方案实现：
30、一种胆固醇单胍偶联物，具有结构通式ⅰ
31、
32、式中x为cnh2n，n为大于或者等于2的整数，优选为2-22。
33、本发明的目的之三采用如下技术方案实现：
34、胆固醇单胍偶联物的制备方法，包括以下步骤：
35、
36、(1)在-20℃～10℃、不断搅拌的条件下，向双胺溶液中加入胆固醇甲酰氯溶液，惰性气体保护下搅拌反应8～24h，得到中间产物a；
37、(2)按照中间产物a与单氰胺、催化剂三氯化铁的摩尔比为1:1～9:0.1～1.0，将步骤(1)得到的中间产物a、单氰胺及催化剂三氯化铁分散在溶剂中，于75℃～120℃、惰性气体中搅拌反应15～24h，即得胆固醇单胍偶联物ⅰ。
38、相比现有技术，本发明的有益效果在于：
39、本发明提供了胆固醇单胍偶联物的应用，所述胆固醇单胍偶联物通过包载药物制备成微粒给药系统。本发明提供的胆固醇单胍偶联物具有两亲性，其作为药物载体一方面能够包载脂溶性药物，一方面由于单胍基团的存在使得化合物带正电，也可以通过静电吸附的方式包载带负电的水溶性药物。胍基的存在还有利于药物的细胞膜内转运，因此单胍胆固醇偶联物可以作为优良的微粒型制剂的载体材料包载药物。单胍胆固醇偶联物与常用载体辅料的相容性较好，该类化合物溶血性低，可以作为静脉给药的剂型辅料；当将其作为药物载体时，有助于发挥更好的药效。本发明还提供了上述胆固醇单胍偶联物的制备方法，该方法重现性好，可制备得到高纯度的产物。
1.一种可作为药用辅料的低溶血性阳离子型脂质，其基本结构式为：
2.如权利要求1所述的阳离子型脂质，其特征在于，胆固醇单胍偶联物可用于低溶血性的阳离子型脂质体或者纳米粒的制备。
3.如权利要求1-2所述的阳离子型脂质，其特征在于，胆固醇单胍偶联物可以替代胆固醇用于低溶血性阳离子脂质体的制备。
