涉及一种融合蛋白以及其作为药物载体、药物复合物和药物组合物的用途，所述融合蛋白包括谷胱甘肽-s-转移酶和具有靶细胞或靶蛋白结合能力的蛋白质。
背景技术：
1、纳米颗粒具有优异的生物分布能力，可以调节药物释放程度，因此被用作成像设备和靶向治疗剂等领域的有用工具。众所周知，在通常情况下，当纳米颗粒的直径为200nm时，可以在肿瘤周围的血管附近泄漏，由于肿瘤周围没有形成淋巴管，压力较低，因此泄漏的纳米颗粒可以继续残留在肿瘤组织中。这一过程称为epr效应（增强渗透性和保留效应，enhanced permeability and retention effect），通过该效应可以提高药物载体的渗透性和保留性。
2、目前商业上使用的纳米颗粒，代表性实例有：紫杉醇（abraxane）和阿霉素（doxil）。然而，血管渗透性因肿瘤而异，其局限性在于，当静脉注射纳米颗粒时，单核吞噬细胞系统（mononuclear phagocyte system，mps）为了清除这些可以在肝脏和脾脏等网状内皮类组织（reticuloendothelial organ）中迅速积累。由此，应用纳米颗粒的靶向治疗剂可以降低治疗效果，并且由于纳米颗粒的毒性可能会出现副作用。
3、为了克服这些缺点，开发了一种通过聚乙二醇化（poly(ethylene glycol)ylation, pegylation）包裹纳米颗粒的方法。使用这些方法时，其优点在于可以延长纳米颗粒在体内循环系统中循环的时间，但相反地，进入靶细胞的可能性降低，并通过非特异性结合靶向靶细胞以外的细胞，这也可以降低治疗效率。
4、在使用纳米颗粒作为药物载体时，提出了一种旨在诱导纳米颗粒的结构变化的策略，以增强药物递送的靶向能力以及epr效果。具体地，不断尝试通过诱导结构变化，如在纳米颗粒表面涂覆与癌细胞中过表达的受体结合的抗体、蛋白质或肽等，来提高药物载体的靶向能力。然而，其局限性在于，这些方法并不能有效提高肿瘤靶向效率，反而提供了靶向配体，使纳米颗粒能够通过mps的体内免疫反应更快地被清除，从而在整体肿瘤治疗效果方面并没有呈现出显著的治疗效果。
5、理论上，当暴露于生理环境时，根据熵的水分子排列、颗粒表面的电荷补偿（charge compensation）或疏水部分的暴露等引起综合作用，纳米颗粒的表面以降低表面能的方向会自然地被其他生物分子包围。此时，各种生物分子非特异性吸附在纳米颗粒表面的表面，这种形式称为蛋白冠（protein corona）。当蛋白冠被其他分子包围，其原有的分子特征发生改变，阻断了向靶细胞或器官的靶向能力和纳米颗粒所表现出的各种生物学功能。因此，仍在继续研究如何调节蛋白冠，以便将纳米颗粒作为靶向治疗剂应用于临床水平。
6、因此，在基于纳米颗粒的靶向治疗剂的制备过程中，开发了一种通过先在纳米颗粒表面形成蛋白冠来调节其的方法。为此，为了避免靶向能力被蛋白冠阻断，已公开了一种通过将纳米颗粒的表面改变为两性离子（zwitterionic）、peg和碳水化合物残基等，来最小化与血清中蛋白质的相互作用的方法。此外，可以用失调（dysopsonic）蛋白预涂覆纳米颗粒，并通过血浆中所需蛋白的循环来调节蛋白冠。因此，预涂覆有蛋白冠的纳米颗粒增加了胶体状态的稳定性，具有在血液中持续循环时间而不被mps清除的作用。然而，即使通过这些方法，靶向目标的靶向能力也能受到限制，并且由于预涂覆中使用的蛋白质和纳米颗粒之间通过生物相互作用产生的生化作用尚不清楚，在临床应用中也受到限制。
技术实现思路
1、技术问题
2、一方面提供一种药物复合物，包括：谷胱甘肽-s-转移酶（glutathione-s-transferase, gst）分子；具有与人表皮生长因子受体2（human epidermal growth factorreceptor2、her2）结合能力的抗体、亲和体（affibody）或双抗体（diabody）分子；连接所述谷胱甘肽-s-转移酶和所述抗体、亲和体或双抗体的接头；以及由所述谷胱甘肽-s-转移酶和谷胱甘肽（gsh，glutathione）分子结合的7-乙基-10-羟基喜树碱。
3、另一方面提供一种用于预防或治疗增殖性疾病的药物组合物，包括：谷胱甘肽-s-转移酶（glutathione-s-transferase, gst）分子；具有与人表皮生长因子受体2（humanepidermal growth factor receptor2，her2）结合能力的抗体、亲和体（affibody）或双抗体（diabody）分子；连接所述谷胱甘肽-s-转移酶和所述抗体、亲和体或双抗体的接头；以及由所述谷胱甘肽-s-转移酶和谷胱甘肽分子结合的7-乙基-10-羟基喜树碱。
4、又另一方面提供一种预防或治疗增殖性疾病的方法，所述方法包括以下步骤：向有需要的个体施用有效量的药物复合物，所述药物复合物包括：谷胱甘肽-s-转移酶（glutathione-s-transferase, gst）分子；具有与人表皮生长因子受体2（humanepidermal growth factor receptor2，her2）结合能力的抗体、亲和体（affibody）或双抗体（diabody）分子；连接所述谷胱甘肽-s-转移酶和所述抗体、亲和体或双抗体的接头；以及由所述谷胱甘肽-s-转移酶和谷胱甘肽分子结合的7-乙基-10-羟基喜树碱。
5、又另一方面提供一种在制备用于预防或治疗增殖性疾病的药物制剂的药物复合物的用途，所述药物复合物包括：谷胱甘肽-s-转移酶（glutathione-s-transferase, gst）分子；具有与人表皮生长因子受体2（human epidermal growth factor receptor2，her2）结合能力的抗体、亲和体（affibody）或双抗体（diabody）分子；连接所述谷胱甘肽-s-转移酶和所述抗体、亲和体或双抗体的接头；以及由所述谷胱甘肽-s-转移酶和谷胱甘肽分子结合的7-乙基-10-羟基喜树碱。
6、技术方案
7、一方面提供一种药物复合物，包括：谷胱甘肽-s-转移酶（glutathione-s-transferase, gst）分子；具有与her2（人表皮生长因子受体2，human epidermal growthfactor receptor2）结合能力的抗体、亲和体（affibody）或双抗体（diabody）分子；连接所述谷胱甘肽-s-转移酶和所述抗体、亲和体或双抗体的接头；以及由所述谷胱甘肽-s-转移酶和gsh（谷胱甘肽，glutathione）分子结合的7-乙基-10-羟基喜树碱。
8、在本说明书中，术语“抗体（antibody）”是本领域公知的术语，意指对抗原性部位指示的特异性蛋白质分子。本说明书的目的而言，抗体意指与靶细胞或靶细胞上表达的受体特异性结合的抗体，并且这些抗体通过按照常规方法将每个基因克隆到表达载体中，以获得由所述标记基因编码的蛋白质，并通过常规方法从获得的蛋白质来制备。这也包括可以由所述蛋白质制备的部分肽，本发明的部分肽包括至少7个氨基酸，优选为9个氨基酸，更优选为12个以上氨基酸。本说明书的抗体的形式没有特别限制，只要是多克隆抗体、单克隆抗体、人源化抗体或具有抗原结合性，则作为其一部分的抗原结合片段也包含在本说明书的抗体中，并可包含所有免疫球蛋白抗体。
9、在本说明书中，“亲和体分子（affibody molecule）”可意指能够与特定靶蛋白（受体）结合的抗体模拟物。通常，亲和体分子由20至150个氨基酸残基组成，并且可以由2至10个α螺旋组成。更详细地，所述亲和体分子可以包括抗-erbb亲和体分子（ab31889）、her2-特异性亲和体分子（zher2:342）、抗-egfr亲和体分子（zegfr:2377）等。并且，其不限于此，包括能够识别细胞中的特定受体或靶蛋白的所有亲和体分子。所述亲和体分子可识别的靶受体或靶蛋白的实例可以为：淀粉样β肽、突触核蛋白（例如，α-突触核蛋白）、载脂蛋白（例如，载脂蛋白a1）、补体因子（complement factor）(例如，c5)、碳酸酐酶（carbonic anhydrase）（例如，caix）、白细胞介素-2受体α链（il2ra；cd25）、细胞表面的cd抗原（例如，cd28）、或c-jun、因子viii、纤维蛋白原（fibrinogen）、gp120、h-ras、her2、her3、hpv16 e7、iapp（人胰岛淀粉样多肽，human islet amyloidpolypeptide）、免疫球蛋白a（iga）、ige、igm、白细胞介素（例如，il-1、il-6、il-8、il-17）、胰岛素、葡萄球菌蛋白a结构域（staphylococcalprotein a domain）、raf-1、lov结构域（光-氧-电压-感应结构域，light-oxygen-voltage-sensing domain）、或rsv g蛋白。关于所述亲和体的信息描述于stefan stahl等，亲合体分子在生物技术和医学中的应用，生物技术发展趋势（affibody molecules inbiotechnological and medical applications，trends inbiotechnology），2017年8月，第35卷，第8期，所述文献其全文通过引用并入本说明书中。
10、在本说明书中，术语“接头（linker）”是指连接两个以上化学结构的分子。具体地，所述接头可以是由1至400个、1至200个、或2至200个任意氨基酸组成的多肽。所述肽接头可以包括gly、asn和ser残基，还可以包括中性氨基酸，例如thr和ala。适合肽接头的氨基酸序列是本领域已知的。还可以考虑接头的优化来调整拷贝数“n”，以实现功能部分之间的适当分离或维持必要的内部-部分（inter-moiety）之间的相互作用。
11、在一具体例中，所述肽接头可以是具有蛋白酶抗性的接头。具体地，具有抗性是指不被蛋白酶结合、和/或不被蛋白酶切割、和/或在与蛋白酶接触时保持稳定、和/或保留其活性。
12、在一具体例中，所述肽接头可以是包含g、s和/或t残基的柔性接头。本领域已知的其他柔性接头，例如有g和s接头，其不仅添加极性氨基酸残基以提高水溶性，还添加t和a等氨基酸残基以保持柔性。具体地，所述接头可具有选自(gpss)n和(spgs)n的通式，在这种情况下，独立地，p为1至10的整数，s为0至10的0或整数，p+s为20以下的整数，以及n为1至20的整数。接头的实例为：(ggggs)n（seq id no:2）、(sgggg)n（seq id no:3）、(srssg)n（seq idno:4）、(sgssc)n（seq id no:5）、(gkssgsgsesks)n（seq id no:6）、(rppppc)n（seq id no:7）、(ssppppc)n（seq id no:8）、(gstsgsgkssegkg)n（seq id no:9）、(gstsgsgkssegsgstkg)n（seq id no:10）、(gstsgsgkpgsgegstkg)n（seq id no:11）或(egkssgsgseskef)n（seq id no:12），其中所述n为1至20、或1至10的整数。
13、另一方面，提供一种多核苷酸，所述多核苷酸编码所述gst分子和具有与her2结合能力的抗体、亲和体或双抗体分子结合的融合蛋白。
14、本说明书中，术语“多核苷酸”是指以单链或双链形式存在的脱氧核糖核苷酸或核糖核苷酸的聚合物。包括rna基因组序列、dna（gdna和cdna）以及由其转录的rna序列，除非另有提及，还包括天然多核苷酸、以及具有修饰的糖或碱基位点的其类似物（analogue）。在一具体例中，所述多核苷酸是短链多核苷酸。
15、又另一方面，提供一种包含所述多核苷酸的载体。
16、本说明书中，术语“载体”是能够在合适的宿主细胞中表达目标蛋白的载体，是指含有可操作地连接以表达基因插入物的调节元件的基因构建物。根据一实施例的载体可以包括表达调节元件，例如启动子、操纵子、起始密码子、终止密码子、聚腺苷酸化信号和/或增强子，并且载体的启动子可以是组成型或诱导型。另外，所述载体可以是能够在宿主细胞中稳定表达所述融合蛋白的用于表达的载体。所述用于表达的载体可以是在本领域中用于植物、动物或微生物中表达外源蛋白质的常规载体。所述重组载体可以通过本领域已知的各种方法构建。例如，所述载体可以包括用于选择含有载体的宿主细胞的选择性标记，如果载体是可复制的，则可以包括复制起点。另外，载体可以自我复制或导入宿主dna中，并且所述载体可以选自由质粒、慢病毒、腺病毒、腺相关病毒、逆转录病毒、单纯疱疹病毒和痘苗病毒组成的组。
17、所述载体包含可在动物细胞例如哺乳动物细胞中操作的启动子。根据一实施例，合适的启动子包括源自哺乳动物病毒的启动子和源自哺乳动物细胞基因组的启动子，例如可包括：cmv（巨细胞病毒，cytomegalovirus)启动子、u6启动子和h1启动子、mlv（鼠白血病病毒，murine leukemia virus）、ltr（长末端重复，long terminal repeat）启动子、腺病毒早期启动子、腺病毒晚期启动子、痘苗病毒7.5k启动子、sv40启动子、hsv的tk启动子、rsv启动子、ef1 α启动子、金属硫蛋白启动子、β-肌动蛋白启动子、人il-2基因的启动子、人ifn基因的启动子、人il-4基因的启动子、人淋巴毒素基因的启动子、人gm-csf基因的启动子、人磷酸甘油酸激酶（pgk）启动子、小鼠磷酸甘油酸激酶（pgk）启动子和生存素（survivin）启动子。
18、并且，所述载体中，前述的融合蛋白可以与启动子可操作地连接。本说明书中，术语“可操作地连接”是指核酸表达调节序列（例如：启动子、信号序列或转录调节因子结合位点阵列）与另一个核酸序列之间的功能性结合，由此所述调节序列可调节所述另一个核酸序列的转录和/或翻译。
19、又另一方面提供包含所述融合蛋白、多核苷酸或载体的宿主细胞。
20、所述细胞可以为，例如，真核细胞可以为酵母、霉菌、原生动物（protozoa）、植物、高等植物和昆虫、或两栖动物的细胞、或哺乳动物细胞如cho、hela、hek293和cos-1等；例如可以为，本领域常用的培养细胞（体外）、移植细胞（graft cell）和原代细胞培养（体外和离体（ex vivo））、体内（in vivo）细胞、以及包括人类在内的哺乳动物的细胞（mammaliancell）。另外，所述生物体可以为酵母、霉菌、原生动物、植物、高等植物和昆虫、两栖动物或哺乳动物。并且，所述细胞可以为动物细胞或植物细胞。
21、使用药物载体递送至个体内的药物活性成分的类型可包括：抗癌剂、造影剂（染料）、激素剂、抗激素剂、维生素剂、钙制剂、矿物质制剂、糖类剂、有机酸制剂、蛋白质氨基酸制剂、解毒剂、酶制剂、代谢制剂、糖尿病联合剂、组织再生用药、叶绿素制剂、染料制剂、肿瘤用药、肿瘤治疗剂、放射性药物、组织细胞诊断剂、组织细胞治疗剂、抗生素制剂、抗病毒剂、复合抗生素制剂、化疗剂、疫苗、毒素、类毒素、抗毒素、钩端螺旋体血清、血液制剂、生物制剂、镇痛剂、免疫原性分子、抗组胺剂、过敏用药、非特异性免疫原性制剂、麻醉剂、兴奋剂、精神神经用剂、小分子化合物、核酸、适体、反义核酸、寡核苷酸、肽、sirna和微小rna等。
22、sn-38可以为抗癌剂，可包括其药学上可接受的盐。“sn-38（7-乙基-10-羟基喜树碱，7-ethyl-10-hydroxycamptothecin）”是伊立替康（irinotecan）（又称“cpt-11”）的活性成分，通过抑制i型dna拓扑异构酶（topoisomerase）活性来发挥抗肿瘤作用。与伊立替康相比，在体外对抗各种癌细胞，能表现出高达1000倍以上的细胞毒性活性。
23、在本发明中，谷胱甘肽-s-转移酶和sn-38（7-乙基-10-羟基喜树碱）的结合可以是通过gsh（谷胱甘肽，glutathione）进行的。即，所述sn-38可以是gsh结合的sn-38。gsh可作为谷胱甘肽-s-转移酶的结合位点，将sn-38与谷胱甘肽-s-转移酶连接。
24、所述sn-38分子可以是负载sn-38或能够负载sn-38的纳米颗粒。根据现有技术，只要纳米颗粒可以用作药物载体，则纳米颗粒可以不受限制地应用。具体地，可以为选自下组中的任意一种：介孔二氧化硅纳米颗粒（mesoporous silica nanoparticle，msn）、金纳米颗粒（gold nanoparticle）、磁性纳米颗粒（magnetic nanoparticle）、核酸-金属有机骨架纳米颗粒（nucleic acid-metal organic framework nanoparticle）和聚合物纳米颗粒(polymer nanoparticle）。还可以是在所述纳米颗粒上结合有gsh（谷胱甘肽，glutathione）的颗粒。由此，所述纳米颗粒可以与含有gst的融合蛋白结合。
25、在一具体例中，所述sn-38分子可以由下述化学式1所示。
26、[式1]
27、
28、另一方面提供一种用于预防或治疗增殖性疾病的药物组合物，该组合物包括：谷胱甘肽-s-转移酶（glutathione-s-transferase, gst）分子；具有与人表皮生长因子受体2（human epidermal growth factor receptor2，her2）结合能力的抗体、亲和体（affibody）或双抗体（diabody）分子；连接所述谷胱甘肽-s-转移酶和所述抗体、亲和体或双抗体的接头；以及由所述谷胱甘肽-s-转移酶和谷胱甘肽（glutathione，gsh）分子结合的7-乙基-10-羟基喜树碱。
29、又另一方面提供一种预防或治疗增殖性疾病的方法，所述方法包括以下步骤：向有需要的个体施用有效量的药物复合物，所述药物复合物包括：谷胱甘肽-s-转移酶（glutathione-s-transferase, gst）分子；具有与人表皮生长因子受体2（humanepidermal growth factor receptor2，her2）结合能力的抗体、亲和体（affibody）或双抗体（diabody）分子；连接所述谷胱甘肽-s-转移酶和所述抗体、亲和体或双抗体的接头；以及由所述谷胱甘肽-s-转移酶和gsh（谷胱甘肽）分子结合的7-乙基-10-羟基喜树碱。
30、又另一方面提供一种在制备用于预防或治疗增殖性疾病的药物制剂的药物复合物的用途，所述药物复合物包括：谷胱甘肽-s-转移酶（glutathione-s-transferase, gst）分子；具有与人表皮生长因子受体2（human epidermal growth factor receptor2，her2）结合能力的抗体、亲和体（affibody）或双抗体（diabody）分子；连接所述谷胱甘肽-s-转移酶和所述抗体、亲和体或双抗体的接头；以及由所述谷胱甘肽-s-转移酶和gsh（谷胱甘肽）分子结合的7-乙基-10-羟基喜树碱。
31、在本说明书中，术语“增殖性疾病”是指由于细胞增大而引起的异常扩张导致的疾病。增殖性疾病可以与以下因素有关：1）正常静止期细胞的病理性增殖；2）细胞从正常位置的病理性迁移（例如，新生物细胞的转移）；3）如基质金属蛋白酶（例如胶原酶、明胶酶和弹性蛋白酶）等蛋白水解酶的病理性表达；4）病理性血管生成，例如增殖性视网膜病和肿瘤转移；或5）逃避宿主免疫监视和新生物细胞消除。
32、所述增殖性疾病包括癌症（即恶性新生物）、良性新生物和血管生成。
33、在一具体例中，所述癌症可以是血液癌或实体癌。
34、所述血液癌可以选自下组，但不限于：急性髓性白血病（acute myeloidleukemia）、急性淋巴细胞性白血病（acute lymphoblastic leukemia）、慢性髓性白血病（chronic myelogenous leukemia）、多发性骨髓瘤（multiple myeloma）和淋巴瘤（lymphoma）。
35、所述实体癌可以选自下组，但不限于：乳腺癌、大肠癌、头颈癌、肺癌、胃癌、脑癌、皮肤癌、结肠癌、前列腺癌、膀胱癌、肾癌、直肠癌、甲状腺癌、肝癌、宫颈癌、直肠癌、肛门癌、尿道癌、卵巢癌、食道癌和胰腺癌。另外，所述癌症可以为选自对抗癌药物具有耐药性（例如多药耐药性）的胃癌、乳腺癌、肺癌、肝癌、食道癌和前列腺癌组成的组中的任意一种以上。并且，所述癌症可以为转移性癌症，即从最初发生部位分离的癌细胞通过血液、淋巴管等扩散并增殖到其他部位。
36、在一具体例中，所述良性新生物可以包括腺瘤、纤维瘤、血管瘤、结节性硬化症和脂肪瘤。
37、本说明书中，术语“治疗剂”或“药物组合物”是指在施用于受试者时赋予一些有益效果的分子或化合物。有益的效果包括：可做出诊断决定；改善疾病、症状、障碍或病况；减少或预防疾病、症状、障碍或病症的发病；以及通常对疾病、症状、障碍或病况的应对。
38、本说明书中，术语“治疗”或“治疗的”或“缓解的”或“改善的”可互换使用。这些术语是指获得有利或期望结果的方法，包括但不限于治疗益处和/或预防益处。治疗益处是指对治疗中的一种以上疾病、病症或症状的任何治疗上明显的改善或其产生的效果。在预防性益处中，组合物可以施用于处于发生特定疾病、病症或症状的风险的受试者，或即使未出现疾病、状况或病症也可施用于报告有疾病的一种或多种生理症状的受试者。
39、本说明书中，术语“有效量”或“治疗有效量”是指足以引起有利或期望结果的作用剂的量。治疗有效量可以根据所治疗的受试者和病况、受试者的体重和年龄、病况的严重程度、施用方式等中的一种以上而变化，这可以由本领域技术人员容易地确定。所述术语还适用于提供图像的剂量，以通过本文描述的成像方法中任意一种进行检测。具体剂量可以根据所选择的特定作用剂、所遵循的给药疗法、是否与其他化合物组合给药、给药时间、所成像的组织以及负载其的身体递送系统中的一种以上而变化。
40、所述药物组合物在临床给药时可以肠胃外给药，并且可以以常规药物制剂的形式使用。肠胃外给药可以指通过除口服之外的施用途径给药，例如直肠、静脉内、腹膜、肌肉、动脉、透皮、鼻腔（nasal）、吸入、眼球和皮下。当本发明的所述药物组合物用作药物时，其可以进一步含有一种以上表现出相同或相似功能的有效成分。
41、将所述药物组合物制剂化时，使用稀释剂或赋形剂例如常用的填充剂、增量剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂和表面活性剂来配制。用于肠胃外给药的制剂包括灭菌水溶液、非水溶剂、悬浮剂、乳剂、冻干制剂、栓剂。非水溶剂、悬浮剂可使用植物油，例如丙二醇（propylene glycol）、聚乙二醇、橄榄油；可注射的酯，例如油酸乙酯等。栓剂的基质可使用witepsol、聚乙二醇（macrogol）、吐温（tween）61、可可脂（cacao butter）、月桂脂（laurinum）和甘油明胶等。
42、并且，所述药物组合物可以通过与各种药学上可接受的载体（carrier）如生理盐水或有机溶剂混合来使用，并且为了提高稳定性或吸收性，可以使用如葡萄糖、蔗糖或葡聚糖等碳水化合物、例如抗坏血酸（ascorbic acid）或谷胱甘肽（glutathione）等抗氧化剂（antioxidants）、螯合剂（chelating agents）、小分子蛋白质或其他稳定剂（stabilizers）作为药剂。
43、所述药物组合物的有效剂量为0.01至100mg/kg，优选为0.1至10mg/kg，每日可给药1至3次。
44、本说明书中，术语“受试者”、“个体”和“患者”可以互换使用，是指脊椎动物，优选哺乳动物，更优选人。哺乳动物包括但不限于鼠科动物、猴子、人、农场动物、运动动物和宠物。还包括体内获得或体外培养的生物实体（entity）的组织、细胞及其后代。
45、另一方面提供了一种具有蛋白冠层屏蔽（protein corona shield）的纳米颗粒(protein corona shield nanoparticle，pcsn)，其包含以下组成：
46、a）能够负载药物的纳米颗粒；b）与纳米颗粒表面结合并含有谷胱甘肽-s-转移酶（glutathione-s-transferase，gst）的融合蛋白。
47、另外，本发明提供了一种具有蛋白冠层屏蔽的纳米颗粒药物载体或药物复合物，其中所述纳米颗粒的内部负载药物。
48、另外，本发明提供了一种具有蛋白冠层屏蔽的纳米颗粒药物载体或药物复合物的制备方法，包括以下步骤i）至iii）：
49、i）将接头（例如，gsh）结合至纳米颗粒表面；ii）将药物加载到所述步骤i）中与接头结合的纳米颗粒的内部或表面；以及iii）通过在所述步骤ii）中负载药物的纳米颗粒的表面涂覆gst融合蛋白，形成蛋白冠层屏蔽（pcs）。
50、具有所述蛋白冠层屏蔽（protein corona shield）的纳米颗粒，先产生了表面预涂覆融合蛋白的蛋白冠层屏蔽，因此在体内环境中不会形成被血清蛋白包围的冠层，从而能够逃避巨噬细胞引起的免疫反应，具有显著的隐形效果（stealth effect）。因此，具有所述蛋白冠层屏蔽的纳米颗粒（pcsn）不仅可以持续体内的残留时间，而且能够提高对靶细胞的靶向能力，可以有效地递送至靶细胞，因此可以有效地用作靶向治疗剂。
51、发明效果
52、根据一方面的融合蛋白和包含其的药物载体或药物复合物，不仅可以持续体内的残留时间，而且能够提高对靶细胞的靶向能力，可以有效地递送至靶细胞，因此具有可以有效地作为靶向治疗剂的作用。
1.一种药物复合物，包括：
2.根据权利要求1所述的药物复合物，其中，所述7-乙基-10-羟基喜树碱分子由下述化学式1所示。
3.根据权利要求1所述的药物复合物，其中，所述亲和体为seq id no:14的her2-特异性亲和体。
4.根据权利要求1所述的药物复合物，其中，所述接头不结合蛋白酶。
5.根据权利要求1所述的药物复合物，其中，所述7-乙基-10-羟基喜树碱分子负载到纳米颗粒中。
6.根据权利要求5所述的药物复合物，其中，所述纳米颗粒为选自介孔二氧化硅纳米颗粒、金纳米颗粒、磁性纳米颗粒、核酸-金属有机骨架纳米颗粒和聚合物纳米颗粒中的任一种。
7.一种用于预防或治疗增殖性疾病的药物组合物，其包括药物复合物作为有效成分，所述药物复合物包括：
8.根据权利要求7所述的药物组合物，其中，所述7-乙基-10-羟基喜树碱分子由下述化学式1所示。
9.根据权利要求7所述的药物组合物，其中，所述增殖性疾病为选自癌症、良性新生物和血管生成中的任一种。
10.根据权利要求9所述的药物组合物，其中，所述癌症为选自乳腺癌、大肠癌、头颈癌、肺癌、胃癌、脑癌、皮肤癌、结肠癌、前列腺癌、膀胱癌、肾癌、直肠癌、甲状腺癌、肝癌、宫颈癌、直肠癌、肛门癌、尿道癌、卵巢癌、食道癌和胰腺癌中的任一种。
11.根据权利要求7所述的药物组合物，其中，所述7-乙基-10-羟基喜树碱负载到纳米颗粒中。
12.根据权利要求11所述的药物组合物，其中，所述纳米颗粒为选自介孔二氧化硅纳米颗粒、金纳米颗粒、磁性纳米颗粒、核酸-金属有机骨架纳米颗粒和聚合物纳米颗粒中的任一种。
13.一种预防或治疗增殖性疾病的方法，所述方法包括以下步骤：向有需要的个体施用有效量的权利要求1所述的复合物。
14.权利要求1所述的复合物在制备用于预防或治疗增殖性疾病的药物制剂中的用途。
