本发明属于药物分析检测领域，具体涉及一种贝前列素钠中间体中杂质的分离检测方法。
背景技术：
1、贝前列素钠是一种抗心血管疾病的药物。其工艺合成步骤长，起始物料、中间体、终产品以及相关杂质多为非对应异构体的混合物，在非手性色谱条件下就会呈现多重峰的情况，导致分析方法开发难度极大。
2、za4是合成贝前列素钠的重要中间体，其合成路线如下：
3、
4、在中间体za4的合成过程中，副反应会生成位置异构体杂质za4-imp5和过度还原杂质za4-imp4。多批次样品（小试，中试，放大批）检测结果显示，这两个杂质在za4中检出量较大，且会参与后续反应，生成结构更加复杂的衍生杂质，不仅影响后续产品质量，还会极大地增加在后续中间体或成品中建立相关杂质控制分析方法的难度。因此需要在za4中建立相应的分析方法，对杂质za4-imp5和杂质za4-imp4进行检测控制。
5、本发明人在建立该分析方法时发现诸多难点：（1）三个物质结构仅有微小差异：za4和za4-imp5仅为取代基取代位置不同的位置异构体，za4和za4-imp4的差异仅是一个c=c双键的差异；（2）za4、za4-imp4以及za4-imp5分别都是由4个非对应异构体的混合物组成，其在非手性色谱体系中就存在多重峰的情况（理论上均可以分成4个峰）；（3）za4、za4-imp4和za4-imp5这三个物质的极性均较小，在反相模式下有很好的保留能力，对于这类物质通常会采用反相分析方法，但经大量实验验证，在反相模式下采用多种不同类型色谱柱、不同体系流动相等条件下，这三种物质均不能实现有效的分离。以上难点为常规液相色谱方法建立中的专属性（分离度）及灵敏度（多重峰）等增加了极大的难度。同时，通过查阅文献、专利等资料，未检索到za4及其杂质现有的检测方法。因此，开发一种能在za4中同时检测za4-imp4以及za4-imp5的分析方法，从源头控制该杂质，以保证获得合格的终产品，很有必要。
技术实现思路
1、针对目前现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种测定贝前列素钠中间体za4中位置异构体杂质za4-imp5和过度还原杂质za4-imp4的检测方法。za4、za4-imp4和za4-imp5结构如下：
2、
3、为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
4、一种采用高效液相色谱检测贝前列素钠中间体中杂质的方法，其特征在于包含以下色谱条件：
5、色谱柱：kromasil 100-5sil，
6、流动相：流动相a为正己烷，流动相b为异丙醇，
7、洗脱方式：等度洗脱，
8、检测器：紫外检测器；
9、所述贝前列素钠中间体为，所述杂质为和。
10、进一步地，上述检测方法中，所述色谱条件中，流动相中流动相a:流动相b为98.5:1.5。
11、进一步地，上述检测方法中，所述色谱条件中的流速为0.9 ml/min~1.1 ml/min，优选为1.0 ml/min。
12、进一步地，上述检测方法中，所述色谱条件中的柱温为20℃~27℃，优选为20℃。
13、进一步地，上述检测方法中，所述色谱条件中的检测波长为285nm。
14、本发明的有益技术效果是，采用kromasil 100-5sil色谱柱、正己烷和异丙醇作为流动相，使用等度洗脱，可有效分离贝前列素钠中间体za4中的za4-imp4和za4-imp5这两种关键杂质，并对其进行准确定量，对该两种杂质的检测限分别低至0.015%和0.014%。本发明的方法简单，且具有准确度高、重复性好、灵敏度高等优点，能够有效地对贝前列素钠中间体za4进行质量控制，确保获得质量合格的贝前列素钠终产品。
1.一种采用高效液相色谱检测贝前列素钠中间体中杂质的方法，其特征在于包含以下色谱条件：
2.根据权利要求1所述的检测方法，所述流动相中，流动相a:流动相b为98.5:1.5。
3. 根据权利要求1所述的检测方法，所述色谱条件中的流速为0.9 ml/min~1.1 ml/min。
4. 根据权利要求3所述的检测方法，所述色谱条件中的流速为1.0 ml/min。
5.根据权利要求1所述的检测方法，所述色谱条件中的柱温为20℃~27℃。
6.根据权利要求5所述的检测方法，所述色谱条件中的柱温为20℃。
7.根据权利要求1所述的检测方法，所述色谱条件中的检测波长为285nm。
