本发明属于生物医药,具体涉及一种诊断宫颈癌的标志物、试剂、应用及抑制肿瘤细胞的药物。
背景技术:
1、肿瘤生物标志物是反映疾病发生、发展和预后的一系列物质,在临床上广泛应用于疾病的早期诊断、治疗监测和预后评估。开发诊断肿瘤并监测肿瘤患者疾病治疗效果的生物标志物对于提高患者的生存率至关重要。除此之外,研究肿瘤关键基因靶点是提高肿瘤治疗的效果的常用手段。
2、dsg2基因是一种跨膜桥粒钙粘附素,作为桥粒结构中具有细胞粘着力作用的主要蛋白,其功能缺失可以导致细胞粘附能力减弱,与肿瘤细胞的上皮间质转化、侵袭迁移密切相关,同时作为细胞表面跨膜糖蛋白,dsg2基因可接受细胞内外信号,并通过不同的信号通路对肿瘤细胞产生不同效应。在不同的癌症中具有不同的功能,既可以作为癌基因,也可以作为肿瘤抑制因子。dsg2基因作为桥粒结构中具有细胞粘着力作用的主要蛋白,其功能缺失可以导致细胞粘附能力减弱,与肿瘤细胞的上皮间质转化、侵袭迁移密切相关。青蒿素衍生物-双氢青蒿素(dihydroartemisinin,dha),在人体内药理活性较强,应用于肿瘤治疗是现在的研究热点。dha作用于肿瘤细胞可导致细胞周期阻滞于g0/g1期或g2/m期并激活凋亡因子促进细胞凋亡。与传统抗肿瘤药物相比,dha对肿瘤的作用效果明显,而对正常细胞的毒性较小。但dsg2基因在dha治疗宫颈癌中的作用机制仍然不清楚。
技术实现思路
1、针对现有技术中dsg2基因在dha治疗宫颈癌中的作用机制不清楚的问题,提供一种诊断宫颈癌的标志物、试剂、应用及抑制肿瘤细胞的药物。
2、本发明解决上述技术问题所采用的技术方案如下:
3、一方面,本发明提供一种诊断宫颈癌的标志物,所述标志物为dsg2基因,所述dsg2基因包括正义链和与所述正义链对应的反义链,所述正义链选自“序列1”,所述反义链选自“序列2”。
4、可选的,还包括所述dsg2基因的克隆引物以及特异性引物,所述克隆引物包括“序列3”、“序列4”、“序列5”和“序列6”,所述特异性引物包括“序列7”和“序列8”。
5、另一方面,本发明提供一种试剂,包括所述的诊断宫颈癌的标志物水平的试剂。
6、可选的,试剂包括所述dsg2基因的克隆引物以及特异性引物,所述克隆引物包括“序列3”、“序列4”、“序列5”和“序列6”,所述特异性引物包括“序列7”和“序列8”。
7、可选的,所述试剂还包括缓冲剂、保护剂、防腐剂、助溶剂、渗透压调整剂和ph调节剂中的一种或多种。
8、可选的,所述试剂盒包括抗体和探针的一种或多种。
9、另一方面,本发明提供的试剂在制备诊断或辅助诊断宫颈癌产品中的应用。
10、另一方面,本发明提供一种抑制肿瘤细胞的药物,包括阻断dsg2基因正常转录或转录后翻译的crispr基因编辑治疗药物或反义核酸药物。
11、可选的,还包括双氢青蒿素。
12、可选的,阻断所述dsg2基因正常转录或转录后翻译的方法包括crispr/cas9基因编辑和rna干扰中的一种或多种。
13、可选的,所述肿瘤细胞包括宫颈癌细胞。
14、本发明的有益效果在于:
15、本发明提供的宫颈癌的标志物,并将所述dsg2基因作为宫颈癌诊断的标志物,进行宫颈癌的预后评估和药物制备;发明人通过一系列实验验证发现:当dha作为宫颈癌细胞损伤诱导剂的条件下,dsg2基因异位表达改变了许多参与细胞周期调节和癌症发展的基因的表达,并且参与调节肿瘤细胞增殖和肿瘤发生,并发现过表达的dsg2基因可抵抗dha对宫颈癌细胞的损伤作用,即所述dsg2基因与宫颈癌的发生和发展密切相关,具有诊断和治疗价值,进而明确了dsg2基因在dha引起的肿瘤细胞损伤中的重要意义,使dsg2基因成为宫颈癌药物治疗的辅助靶点,通过延长药物疗效为宫颈癌的治疗提供新的思路。
1.一种诊断宫颈癌的标志物,其特征在于,所述标志物为dsg2基因,所述dsg2基因包括正义链和与所述正义链对应的反义链,所述正义链选自“序列1”,所述反义链选自“序列2”。
2.一种试剂,其特征在于,包括用于检测权利要求1所述的诊断宫颈癌的标志物水平的试剂。
3.根据权利要求2所述的一种试剂,其特征在于,包括所述dsg2基因的克隆引物以及特异性引物,所述克隆引物包括“序列3”、“序列4”、“序列5”和“序列6”,所述特异性引物包括“序列7”和“序列8”。
4.根据权利要求2所述的一种试剂,其特征在于,所述试剂还包括缓冲剂、保护剂、防腐剂、助溶剂、渗透压调整剂和ph调节剂中的一种或多种。
5.根据权利要求2所述的一种试剂,其特征在于,所述试剂还包括抗体和探针中的一种或多种。
6.根据权利要求2~5任意一项所述的试剂在制备诊断或辅助诊断宫颈癌产品中的应用。
7.一种抑制肿瘤细胞的药物,其特征在于,包括阻断dsg2基因正常转录或转录后翻译的crispr基因编辑治疗药物或反义核酸药物。
8.根据权利要求7所述的一种抑制肿瘤细胞的药物,其特征在于,还包括双氢青蒿素。
9.根据权利要求8所述的一种抑制肿瘤细胞的药物,其特征在于,阻断所述dsg2基因正常转录或转录后翻译的方法包括crispr/cas9基因编辑和rna干扰中的一种或多种。
10.根据权利要求9任意一项所述的抑制肿瘤细胞的药物,其特征在于,所述肿瘤细胞包括宫颈癌细胞。
